购买的小技巧: 液相色谱仪等分析仪器都有相应的指标,所以我们购买液相色谱仪一定先看是否满足标准,在选择厂家以及型号方面多做对比,才能选择出适合自己使用且的仪器。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。液相色谱仪的指标比较多,包括检测器的、泵的等等,他的主要指标有漂移、定性定量重复性、小检测浓度和噪音,下面我们就看看这几项的选择。 我们先看漂移的指标,
分离纯化
购买的小技巧: 液相色谱仪等分析仪器都有相应的指标,所以我们购买液相色谱仪一定先看是否满足标准,在选择厂家以及型号方面多做对比,才能选择出适合自己使用且的仪器。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。液相色谱仪的指标比较多,包括检测器的、泵的等等,他的主要指标有漂移、定性定量重复性、小检测浓度和噪音,下面我们就看看这几项的选择。 我们先看漂移的指标,我们首先需要了解什么是漂移,漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离原点的距离,通常用来衡量仪器稳定快慢,好的仪器会在很短时间就能稳定,提高分析效率。定性定量重复性主要是考核仪器稳定性的指标,这对于分析样品来说是非常重要的,好的仪器其稳定性应该是十分的。小检测浓度是和噪音成正比的,噪音越大,小检测浓度就越大,灵敏度就越低,某些厂家回避了这个指标,说明他们不愿在小检测浓度的基础上去比较噪音。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好,否则噪音过大将会导致基线不稳,甚至影响分析结噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度,噪音越大,检测的灵敏度就越低。
液相色谱仪的常规操作及维修: 1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。 2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3、打开HPLC工作站,连接好流动相管道,连接检测系统。特殊情况下,可加热至高于使用温度10-20℃左右,但是一定不能超过色谱柱的温度上限,那样极易损坏色谱柱。 4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。 5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。 6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。 7、设计走样方法。点击file,选取se-lectusersandmethods,可以选有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a、进样前的稳流,一般2-5分钟;b、基线归零;c、进样阀的loading-inject转换;d、走样时间,随不同的样品而不同。 8、进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击trun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。 9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。

液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。有不少文献报道,对填料可以进行一下处理提高了分离效果,如,对硅胶进行的(或缓冲液)处理。液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。也称现代液相色谱。
HPLC的特点和优点
HPLC有以下特点:
高压—压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米为75 Kg/cm2以上。
高速—流速为0.1~10.0 ml/min。
—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。

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