武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳
Rab5-GTP
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往。
NewEast Biosciences Arf6激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆抗l体和Arf6特异性兔多克l隆抗l体,该抗l体特异性识别Arf6-GTP,但不能识别Arf6-GDP。 鉴于单克l隆抗l体对其抗原的高度亲和力,可以在短时间内进行激l活测定。 该测定法可提供可靠的结果,并具有一致的可重复性。
这些抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体还可用于通过免l疫组织化学监测细胞和组织中Arf 6的激l活。
NewEast Biosciences Arf6激l活测定试剂盒提供了一种简单且的方法来监测Arf 6的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。
NewEast Biosciences Arf 6激l活检测试剂盒基于特定于配置的抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体,可从细胞提取物或体外载有GTPγS的Arf 6激l活检测方法来测量活性Arf 6-GTP水平。 简而言之,抗活性的Arf 6小鼠单克l隆抗l体将与含有Arf 6-GTP的细胞裂解液一起孵育。 然后,结合的活性Arf 6将被蛋白A / G琼脂糖拉低。 分别使用抗Arf 6兔多克l隆抗l体通过免l疫印迹分析检测沉淀的活性Arf 6。
1.抗活性的Arl1,小鼠单克l隆抗l体(货号26924):一小瓶–溶于pH 7.4的PBS中的22 μL(1mg / ml),含有50%甘油和0.05%叠氮l化钠。
该抗l体特异性识别所有脊椎动物的Arl1-GTP。
2.蛋白A / G琼脂糖(目录号30301):一小瓶– 400 μL 50%浆液。
3. 5X测定/裂解缓冲液(目录号30302):一瓶– 30 mL的250 mM Tris-HCl,pH 8,750mM NaCl,50 mM MgCl2,5 mM EDTA,5%Triton X-100。
4.抗Arl1,小鼠单克l隆抗l体(目录号26056):一小瓶– 100 μL(1 mg / ml)
pH 7.4的PBS中含有50%的甘油。
5. 100 XGTPγS(货号30303):1瓶– 100 μl,10 mM,使用5 μLGTPγS
GTP标记的0.5 mL细胞裂解物。
6. 100 X GDP(产品目录号30304):一个样品瓶– 100 μl,100 mM,使用5 μL GDP
GDP标记的0.5 mL细胞裂解物。
1.刺激的和非刺激的细胞裂解液
2.蛋白酶抑制l剂
3. 4°C管摇杆或摇床
4. 0.5 M EDTA,pH8.0
5. 1 M氯化镁
6. 2倍还原SDS-PAGE样品缓冲液
7.电泳和免l疫印迹系统
8.免l疫印迹洗涤缓冲液,例如TBST(10 mM Tris-HCl,pH 7.4,0.15 M NaCl,0.05%Tween-20)
9.免l疫印迹封闭缓冲液(TBST包含5%脱脂奶粉或3%BSA)
10. PVDF或硝l酸纤维素膜
11.二抗
12. ECL检测试剂
1X测定/裂解缓冲液:短暂混合5X储备液,并在去离子水中稀释至1X。 在使用前,添加蛋白酶抑制l剂,例如1 mM PMSF,10 μg / mL亮肽素和10 μg / mL抑肽酶。
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在的子公司。美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等。
悬浮细胞
1.培养细胞并根据需要用活化剂或抑制l剂刺激。
2.进行细胞计数,然后通过离心沉淀细胞。