广州硕谱生物科技有限公司Diol固相萃取柱类型
氧化铝填料的Brockmann活度等级是什么意思?
业界根据氧化铝填料中含水量的不同,划分为五种活度等级。Brockmann定义Ⅰ级氧化铝为450℃灼烧隔夜的氧化铝,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ级氧化铝是Ⅰ 级氧化铝分别加入3%、6%、10%、15%的水而制成。
CNW中性氧化铝的Brockmann活度等级Ⅰ,吸附能力强,对芳
Diol固相萃取柱类型
广州硕谱生物科技有限公司Diol固相萃取柱类型
氧化铝填料的Brockmann活度等级是什么意思?
业界根据氧化铝填料中含水量的不同,划分为五种活度等级。Brockmann定义Ⅰ级氧化铝为450℃灼烧隔夜的氧化铝,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ级氧化铝是Ⅰ 级氧化铝分别加入3%、6%、10%、15%的水而制成。
CNW中性氧化铝的Brockmann活度等级Ⅰ,吸附能力强,对芳香烃和有机胺等富电子化合物的保留能力强。
SPE小柱实例分析
样品预处理:取复方甘1草片30片,精密称定,研细,精密称取约10片量,置磨口锥形瓶中,精密加水90ml,超声处理5分钟,精密加稀盐酸(6→10)10ml,摇匀,超声处理20分钟,使吗1啡溶解,取出,放冷,滤过。
SPE小柱用于复方甘1草片吗1啡含量测定的过程详解。
离子交换固相萃取小柱方法开发中需要注意的问题。
离子交换固相萃取适用于可解离成带电离子的化合物,其机理是利用带电荷的目标化合物离子与带相反电荷的吸附剂之间的静电吸引力。样品基质可以是极性的,如水溶液,也可以是非极性的有机溶液,但在实际应用中以水溶液较多,包括生物体液、江河湖海等自然水、废水等。
常见反相键合硅胶吸附剂的类型
C18柱
C18是目前使用zui多的一种SPE柱,根据2003年的一项统计,在所有使用
的SPE柱中,C18柱占了56%左右。C18柱的主要官能团是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非极性,第二作用力是极性、阳离子交换。在所有键合硅
胶SPE吸附剂中,C18柱的非极性吸附能力zui强。因此,强非极性化合物被C18
吸附后可能较难洗脱。C18难吸附极性非常强的分子,如碳水化合物( carbohy
-drates).C18一般被当作zui没有选择性或通用型的吸附剂,因为绝大多数有机分子或多或少含有非极性基团,C18可以从水溶液中吸附这些有机化合物。因此C18对于同时分离不同结构的化合物时较为适用。由于C18的选择性较低,其zui终萃取物往往没有其他选择性高的填料那么干净。在蛋白质纯化中,C18柱是优1秀的除盐工具,因为样品中的盐在C18柱上没有保留。C18的极性副作用力比其他键合硅胶SPE吸附剂低许多,主要是碳链较长的原因。
色谱柱保存
反相色谱柱,保存溶剂通常是含至少30% 有机相的水溶液,也可在常规清洗后直接保存在有机相中。
如果需要长时间储藏,则需要使用较高比例的有机相(有机相比例至少大于50%)
固相萃取知识
要有效地利用离子交换机理将目标化合物吸附在SPE柱上,必须满足以下两个条件:
(1)目标化合物离子与吸附剂官能团的离子态带相反电荷;
(2)萃取环境的pH必须同时使目标化合物和吸附剂上的官能团带电荷;
(3)萃取环境不能含有高浓度的带有和目标化合物相同电荷的竞争化合物。
在实际操作中,为了满足前两个条件,确保99%以上的目标化合物及固相萃取吸附剂上的官能团能够呈离子态或呈中性状态,应该根据目标化合物及固相萃取吸附剂官能团的pKa来调节样品或SPE柱的pH。
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