广州硕谱生物科技有限公司氰丙基SPE柱厂家
固相萃取操作中常见的问题
回收率低在一次完整的SPE操作中，目标化合物可能会存在于样品溶液流出液、淋洗液、洗脱液或吸附剂中，当“目标物没有回收或回收率低” 现象发生时，可向样品溶液加入标液，然后进行完整的SPE操作并将样品流出液、淋洗液和洗脱液分别收集并分析。
首先确定目标化合物存在于哪一部分，进而确定问题来自下列哪
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固相萃取操作中常见的问题
回收率低在一次完整的SPE操作中，目标化合物可能会存在于样品溶液流出液、淋洗液、洗脱液或吸附剂中，当“目标物没有回收或回收率低” 现象发生时，可向样品溶液加入标液，然后进行完整的SPE操作并将样品流出液、淋洗液和洗脱液分别收集并分析。
首先确定目标化合物存在于哪一部分，进而确定问题来自下列哪一环节：目标化合物在吸附剂上保留不足；目标化合物未被完全洗脱；其他环节。
由于许多化合物同时具有多种官能团，在选择固相萃取机理时，应该根据目标化合物及干扰物的性质来考虑采用哪种萃取机理较为有利。如：2-萘胺是一个弱碱性化合物（pKa=4.16），在一定的pH条件下还可以呈阳离子状态，同时该化合物具有疏水的非极性官能团及亲水的极性官能团。这时，就应该根据样品基质的具体情况来选择有利于将目标化合物与干扰物分离的萃取机理。如果样品基质中同时含有大量的非极性干扰杂质，就应该避免采用非极性的萃取机理，而将样品的pH调节到其pKa两个pH单位，即pH=2.16，并采用阳离子交换机理。反之，如果样品中同时含有大量的阳离子干扰杂质，则应该调节样品的pH至6.16（高于pKa两个单位），采用非极性萃取机理较为有利。
色谱柱清洗
常规清洗：
在储存色谱柱之前，请使用至少20倍柱体积的不带缓冲盐的流动相冲洗色谱柱（去除缓冲盐），再用更强的溶剂冲洗色谱柱（去除强保留成分，反相色谱通常使用甲1醇或乙1腈），然后使用合适的溶剂储存色谱柱。
清洗强保留污染物：
使用如下试剂依次清洗色谱柱
20倍柱体积不带缓冲盐的流动相；
20倍柱体积甲1醇或乙1腈；
20倍柱体积异丙1醇；
20倍柱体积正己烷或氯1仿；
20倍柱体积甲1醇或乙1腈。
固相萃取知识
我们要分析的目标化合物必须具备下列任意一种或以上的官能团才能通过离子作用力将其从样品溶液中分离出来：
（1）可生成阳离子的官能团（带正电荷）
（2）可生成阴离子的官能团（带负电荷）
而且待分析的目标化合物必须在一定的pH环境下才能呈离子化或中性化。
以下是固相萃取操作中常见的问题：
一、回收率低；
二、萃取重现性差；
三、净化效果不理想；
四、SPE柱流速过低。
目标化合物在吸附剂上保留不足当超过5%的目标化合物出现在样品流出液或淋洗液时即可断定“目标化合物在吸附剂上的保留不足”。目标化合物未被完全洗脱当目标化合物在样品溶液流出液和淋洗液中未出现而洗脱液中仅有少量或未出现时，可判断“目标物未被完全洗脱”。
其他环节如果目标化合物在洗脱液中正常出现，那么回收率不足的问题应该来自样品前处理的其他环节。
氨基柱在进酸性样品时，很伤柱子，如使用一段时间后，柱效降低，峰形改变，如何恢复？
答：氨基柱测酸性样品，应该是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。建议：用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0％NH3的乙1腈-水(50:50)溶液冲洗该柱（冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨），之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1％。
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