广州硕谱生物科技有限公司吸附型SPE柱批发
绝大多数的样品都是用保留目标物的模式净化的,下面举个例子:
食品中乙1二胺四乙1酸二钠的检测,样品经提取,络合后,净化;
SPE柱:月旭 WelchromSAX 150mg/6mL;
活化:5 mL 甲1醇、5 mL 水,弃去;
上样:待净化液全部上样,控制流速,不宜过快,弃去;
淋洗:依次用5m
吸附型SPE柱批发
广州硕谱生物科技有限公司吸附型SPE柱批发
绝大多数的样品都是用保留目标物的模式净化的,下面举个例子:
食品中乙1二胺四乙1酸二钠的检测,样品经提取,络合后,净化;
SPE柱:月旭 WelchromSAX 150mg/6mL;
活化:5 mL 甲1醇、5 mL 水,弃去;
上样:待净化液全部上样,控制流速,不宜过快,弃去;
淋洗:依次用5mL水,5mL甲1醇淋洗,抽干;
洗脱:5mL5%甲酸甲1醇水洗脱,抽干,收集洗脱液定容至5mL,过0.22μm滤膜,供液相色谱仪测定。
为什么 HLB小柱子不同于传统的硅胶连接C18,厂商建议可不激1活平衡?
回答: SPE小柱活化平衡的目的有两个,一是使功能团填料的粘附性和伸缩性保持对目标化合物的zui大吸附活性,另一个目的是去除填料本身可能引入的杂质。硅胶键合C18,是一种在硅胶微球表面粘接的疏水性C18官能团,为使其对目标物保持充分吸附活性,需要在湿润环境上样物在填料表层形成的液膜(活化平衡)和上样物的溶剂分子之间具有良好的相容性,目标物在膜间进行传质,与粘合C18发生疏水作用而保留,C18本身不具有水浸润性,直接上样物,C18蜷缩,且由于高度的疏水性,使其难以与目标物中的目标物分子充分接触,因此必须充分保留 HLB小柱内的目标物分子, HLB采用聚合物改性材料,添加亲水基团,使其在上样物溶剂中与目标物分子充分接触。
常见反相键合硅胶吸附剂的类型
C8柱
C8柱的主要官能团辛基( octyl)。其主要作用力是非极性,第二作用力是极
性、阳离子交换。C8的性质与C18十分相近,但由于其支链烷烃没有C18长,所以对非极性化合物的吸附能力没有C18强。正因为如此,对于一些在C18上吸附太强而难以洗脱的化合物,可以用C8来取代。因为C8的碳链较短,不能覆盖硅胶的表面,其极性作用力比C18要强。尽管如此,极性作用力依然不是C8的主要作用力。
淋洗液和洗脱液的优化对于反相模式和正相模式,应在不影响回收率的前提下,增大淋洗液洗脱的强度并降低洗脱液的洗脱强度。
对于反相模式,可将目标化合物的水溶液上样,然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、的甲1醇水溶液洗脱,分别收集洗脱液分析,建立淋洗曲线,找出目标化合物被洗脱时的溶剂体系,淋洗液中甲1醇的含量应稍目标化合物恰好被洗脱时的溶剂体系,而洗脱液中甲1醇的含量应稍高于目标化合物恰好被完全洗脱时的溶剂体系;当纯甲1醇不能洗脱目标化合物时,应试验甲1醇-甲1基shu丁基醚混合溶液的洗脱曲线;对于某些既不溶于水也不溶于甲1醇的离子型化合物,可以在溶剂体系中加入酸或碱。
固相萃取
固相萃取是一种基于色谱分离的样品前处理方法,是近年来应用zui为广泛和成熟的样品前处理方法。固相萃取包括(含有某些官能团的固体吸附剂)和液相(样品和溶剂)。因为固相萃取吸附剂具有不同的功能基团,所以可以吸附和保留特定化合物于固相萃取柱。
固相萃取按其用途可分为两种模式。其中, spe柱是典型的固相萃取方式,其主要作用是吸附被称为目标物吸附的化合物;杂质吸附式固相萃取是指 spe柱吸附样品中的杂质,目标物质流穿不保留。
预柱或保护柱用还是不用的问题!原来分析中药品种时,我一直都是用保护柱。但来到新公司后,发现大家都没有使用,几个实验室连保护柱都没找到一个,也就是说大家从来都没有用过。后来问一个老员工,说是有可能影响药品分析。我就想问:安装保护柱后会影响样品分析吗?我们做的大多是头1孢类的抗1生素。
答:应该这样说,加上保护柱,肯定有利于保护色谱柱不受一些颗粒物质的堵塞,肯定有害于分离度和柱效,因为保护柱中间有着死体积的存在但是如果保护柱接得好,并且尽量控制其匹配性和经常更换,分离度和柱效应该影响并不大。
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