武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。在水产方面,原位杂交技术则主要应用于基因定位(多见于对鱼类和贝类等水生物的研究)和病毒的检测(多见于虾类)。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向提供的生物技术服务。
我公
原位杂交技术服务公司
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。在水产方面,原位杂交技术则主要应用于基因定位(多见于对鱼类和贝类等水生物的研究)和病毒的检测(多见于虾类)。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向提供的生物技术服务。
我公司拥有完善的原位杂交实验平台,丰富的实践经验。我们采用罗氏XX辛原位杂交试剂盒。每条探针可进行60-80张切片的原位杂交。自成立之初,每年都会开展近百项植物相关的原位杂交实验。累计检测基因近千个。
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。此外,原位杂交技术做为染色体高分辨显带技术的补充和发展,在水生物的细胞遗传学的研究领域将发挥更重要的作用。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向提供的生物技术服务。
英文全称是 :in situ hybridization。原位杂交。指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行定量定位的过程。
①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;②组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;另外AD融合靶蛋白如果有DNA的特异性结合,则也可单独报告基因的表达。⑥分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。
原位杂交在前。
(1)常规脱蜡入水。
(2)37℃蛋白酶K消化20min,37℃漂洗液充分洗去蛋白酶K。
(3)滴加探针,加盖玻片,避光、湿盒、37℃过夜孵育。
(4)如果试剂盒允许的话,将试剂盒中洗脱液水浴加温至37℃震荡洗脱多余的探针。
(5)加碱性磷酸酶标记的抗1体,37℃孵育半小时,洗去抗1体后显色。
免1疫组化在后。
(1)将显色后确认为阳性的切片充分漂洗。
(2)在PH为6.0的枸橼酸钠溶液中,微波至96℃左右,作用10min。
(3)滴加一抗,37℃湿盒孵育2h。
(4)充分漂洗切片,滴加二抗,室温下孵育40-50min。
(5)DAB显色后,采用PBS中止显色反应。
(6)不要复染核,不然就盖住原位杂交信号了。
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