大肠杆菌平板计数法检测步骤如下:
1、制备样品稀释液,吸取1mL加入到平板中,倾注55度左右的已灭菌的VRBA琼脂15-20mL,凝固后36度24小时培养,计数紫红色菌落
2、再将合适稀释度的VRBA平板上的紫红色菌落转接10支BGLB,统计阳性率
3、再将计数的VRBA结果X阳性率X稀释度,就是zui终结果。
酶底物法
大肠菌群检测装置
大肠杆菌平板计数法检测步骤如下:
1、制备样品稀释液,吸取1mL加入到平板中,倾注55度左右的已灭菌的VRBA琼脂15-20mL,凝固后36度24小时培养,计数紫红色菌落
2、再将合适稀释度的VRBA平板上的紫红色菌落转接10支BGLB,统计阳性率
3、再将计数的VRBA结果X阳性率X稀释度,就是zui终结果。
酶底物法
方法灵敏度不同,多管发酵法为每 100 m l样本中 2 cfu;酶底物法为每 100 m l样本中1 cfu。
方法步骤不同,多管发酵法为多步骤测定,费时费力; 酶底物法为一步测定,省时省力。
方法耗时不同,多管发酵法对于阴性水样需 24 h 报告结果,对于阳性水样则需72 h报告结果; 酶底物法无论阴性或阳性水样均可24h报告结果。
方法费用不同,多管发酵法可使用半成品培养基或自配培养基,检测成本低廉,目前国内也开发有初发酵试验的成品培养基和一次性耗材,但由于阳性水样必须进行验证试验,从而限制了该商品试剂的应用推广;酶底物法使用商品试剂,目前均有国内外生产商供应,该方法在东部经济发达地区使用较广泛。我们国内也逐步完善替代传统方法,酶底物法检测程控定量封口机会越来越受欢迎,用户也越来越多。
在现在已知的大肠杆菌检测方法中,酶底物法是目前水中大肠杆菌检测的方法。这也就直观的影响到了很多检测人员对于酶底物法检测水中大肠杆菌的方法的掌握,因为如果使用传统的多管发酵法和滤膜法的话,整体的操作过程比较繁琐,并且是试验环境要求比较高。检测时间比较长,所以酶底物法是现在追捧的检测的水中大肠杆菌的方法。
那其实从整个客观角度来说,相对于多管发酵和滤膜法,酶底物法检测步骤大大减少,而且对实验环境要求不高,检测时间可减少到24小时,在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景,可及时检测,预防,较大限度的减少重大公共安全事故的发生几率。酶底物法有商品化试剂供应,实验操作简便,无需确认试验,可同时检测水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌。
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