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氨基固相萃取柱公司询问报价,北京中检维康有限公司

正相固相萃取柱为什么要用非极性溶剂洗脱 固相萃取柱指的是高质的填料,如硅胶,三氧化二铝等,其对物质的吸附能力遵循“相似相容”的原理,也就是对极性大的物质吸附能力强。采用弱极性洗脱剂能够让被吸附的物质选择性的分开,如果采用极性大的溶剂,将导致被吸附的物质没有选择的的“洗脱”,失去了“萃取”的意义。其实固相萃取就是柱色谱分离,相对HPLC而言是一种粗分离技术。 在实验中固相萃取柱
氨基固相萃取柱公司

正相固相萃取柱为什么要用非极性溶剂洗脱

固相萃取柱指的是高质的填料,如硅胶,三氧化二铝等,其对物质的吸附能力遵循“相似相容”的原理,也就是对极性大的物质吸附能力强。采用弱极性洗脱剂能够让被吸附的物质选择性的分开,如果采用极性大的溶剂,将导致被吸附的物质没有选择的的“洗脱”,失去了“萃取”的意义。其实固相萃取就是柱色谱分离,相对HPLC而言是一种粗分离技术。




在实验中固相萃取柱的选择与分类

柱压力方式选择

柱压力可分为:减压、加压、常压。减压柱能够减少固定相硅胶的使用量。

固相萃取柱加压是一种较好的使用方式,特别适用于易分解样品的分离。加压可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集时间;其他条件相同时,常压柱效率较高,但耗时,比如天然化合物的分离。

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固相萃取柱有哪些分类

SPE固相萃取的核心在于填料,即吸附剂。根据吸附剂的不同,固相萃取柱可大致分为以下三类:

1、正相固相萃取固定相(填料):极性物质。分离对象:极性、中等极性、非极性流动相(洗脱剂):非极性、中等极性吸附剂与化合物间作用力:氢键,π—π键等常用正相固相萃取柱:①极性官能团键合硅胶如-CN,-NH2;②极性吸附物质如Silica、Florisil、Alumina

2、反相固相萃取固定相:非极性分离对象:中等到非极性物质流动相:极性(水溶液)或中等极性吸附剂与化合物间作用力:范德华力或色散力常用反相固相萃取柱:十八烷基键合硅胶(C18柱)

3、离子交换固相萃取固定相:带电荷物质分离对象:带电荷的化合物(水溶液、有机溶液)流动相:去离子水、高或低离子强度溶液吸附剂与化合物间作用力:静电吸引可分为两种:①阴离子交换:脂肪族季铵类盐键合硅胶,如SAX、NH2;②阳离子交换:磺酸基,如SCX,羧酸基团如WCX





固相萃取柱操作问题

1、装柱柱子下的活塞避免使用润滑剂,以免被淋洗剂带到产品中。干法和湿法装柱区别较小,只要能把柱子装实即可。装柱前应仔细观察固相萃取柱是否开裂,避免影响分离效果,装柱应该要适度紧密(太紧密淋洗剂流速太慢,太疏松淋洗剂流速过快)、均匀(避免样品从一侧斜着流出),避免过柱时出现大量的气泡。

2、加样用少量的溶剂溶样品加样,打开活塞,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此三次,一般石英变成白色。加入淋洗剂后不可立即加压,等溶样品的溶剂和样品层有分开2cm~4cm,再加压,这样可以避免溶剂夹带样品下行。

3、样品的收集用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡过程。如果样品与硅胶的吸附较强,样品解析较慢。这样就会出现后面的点先出,而前面的点后出的现象,这时可以采用氧化铝作固定相。另外,收集的试管大小要以样品量而定,特别是小量样品,如果用大试管,可能一根就收到了多个样品,如果都用小试管,缺点是工作量太大。

4、处理萃取柱分离后,由于使用了大量的溶剂,其中的杂质也会积累到所需组分中,必要时进行重结晶。另外,过柱时有时会出现气泡,这可能存在两种原因:一是这与使用的溶剂类型有关,如果是易挥发的溶剂,在室温稍高的情况下,很容易出现这种现象。因此,在室温高的时候,应该选择沸点较高,挥发性相对小的溶剂。使用混合溶剂时,使用的两种溶剂的沸点相似。二是在装柱之前,柱内可能存有少量空气,必须用加压的方式将空气排干,这样就可避免柱中存有空气。






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