广州硕谱生物科技有限公司离子交换型SPE柱规格
为什么反相填料C18使用时建议溶液的PH范围是2-8?
C18填料是十八烷1基硅1烷键合硅胶,pH值超出酸性范围时,键合相十八烷1基易发生水解而流失;当流动相pH超出碱性范围时,会加速硅胶的溶解。这两种反应均是不可逆的反应,会影响填料的性能。
当我们极端pH条件下需要使用反相填料时,建议使用聚合物基质的反相填料,
离子交换型SPE柱规格
广州硕谱生物科技有限公司离子交换型SPE柱规格
为什么反相填料C18使用时建议溶液的PH范围是2-8?
C18填料是十八烷1基硅1烷键合硅胶,pH值超出酸性范围时,键合相十八烷1基易发生水解而流失;当流动相pH超出碱性范围时,会加速硅胶的溶解。这两种反应均是不可逆的反应,会影响填料的性能。
当我们极端pH条件下需要使用反相填料时,建议使用聚合物基质的反相填料,如HLB,PSD等,聚合物基质的填料pH耐受范围是1-14,适用范围非常广哦。
SPE小柱的使用过程
下面我们设定填料为保留目标化合物,分析过程如下:
1、预洗活化——除去柱子内的杂质,饱和平衡柱。依次用强溶剂、弱溶剂(缓冲溶液)进行活化。
2、上样——将样品(包括分离物和干扰物)用一定的溶剂溶解,转移入柱并使组分通过吸附剂,吸附剂选择性的保留分离物和一些干扰物。
3、淋洗——用适当的溶剂淋洗吸附剂,使先前保留的干扰物选择性的淋洗掉,分离物富集保留在吸附剂上。
4、洗脱——用小体积的溶剂将被测物质从吸附剂上洗脱下来并收集。
固相萃取操作中常见的问题
回收率低在一次完整的SPE操作中,目标化合物可能会存在于样品溶液流出液、淋洗液、洗脱液或吸附剂中,当“目标物没有回收或回收率低” 现象发生时,可向样品溶液加入标液,然后进行完整的SPE操作并将样品流出液、淋洗液和洗脱液分别收集并分析。
首先确定目标化合物存在于哪一部分,进而确定问题来自下列哪一环节:目标化合物在吸附剂上保留不足;目标化合物未被完全洗脱;其他环节。
由于许多化合物同时具有多种官能团,在选择固相萃取机理时,应该根据目标化合物及干扰物的性质来考虑采用哪种萃取机理较为有利。如:2-萘胺是一个弱碱性化合物(pKa=4.16),在一定的pH条件下还可以呈阳离子状态,同时该化合物具有疏水的非极性官能团及亲水的极性官能团。CNW中性氧化铝的Brockmann活度等级Ⅰ,吸附能力强,对芳香烃和有机胺等富电子化合物的保留能力强。这时,就应该根据样品基质的具体情况来选择有利于将目标化合物与干扰物分离的萃取机理。如果样品基质中同时含有大量的非极性干扰杂质,就应该避免采用非极性的萃取机理,而将样品的pH调节到其pKa两个pH单位,即pH=2.16,并采用阳离子交换机理。反之,如果样品中同时含有大量的阳离子干扰杂质,则应该调节样品的pH至6.16(高于pKa两个单位),采用非极性萃取机理较为有利。
固相萃取柱广泛应用于食品、农产品、环境、生物产品样品的前处理,主要起到净化、分离、浓缩作用。内部的筛板和填料是关键,外形类似注射1器。有时单一溶剂不能把疏水性强的目标化合物完全洗脱下来,则可考虑使用二氯1甲1烷:乙1酸乙酯(1:1,体积比)。相信每个人都会疑惑,为什么我的实验回收率不高?明明前处理并不麻烦,只是过一小柱啊,为什么回收率会低呢?那么问题来了,是不是应该用固相萃取柱呢?包装、规格、型号是否受到关注?
简单明了地介绍一下,什么是固相小柱。
固相萃取小柱是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。大多数用来处理液体样品。萃取、浓缩和净化其中的半挥发性和不挥发性化合物;也可用于固体样品,但必须先把固体样品处理成液体。
对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?
答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。5,中性氧化铝主要通过铝原子中心与带有高负电荷的杂原子作用,如:N、O、P、S及富电子的芳香族化合物。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简单,多进几次样品,直到峰面积和保留时间稳定,再进行正式进样测定。
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