固相萃取柱的操作方法介绍
一、反相萃取柱操作
从极性基体中提取非极性的样品
1、活化:以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润
2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱
3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/溶剂混合液)
4、洗脱:将被测样品,用1-5毫升非极性溶剂分批洗脱至收集容
226固相萃取柱公司
固相萃取柱的操作方法介绍
一、反相萃取柱操作
从极性基体中提取非极性的样品
1、活化:以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润
2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱
3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/溶剂混合液)
4、洗脱:将被测样品,用1-5毫升非极性溶剂分批洗脱至收集容器
二、正相萃取柱操作
从非极性基体中提取极性的样品
1、活化:3-5毫升非极性溶剂淋洗萃取柱
2、清洗:以5毫升适当非极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱
3、洗脱:将被测样品,用1-5毫升极性溶剂分批洗脱至收集容器
三、离子交换萃取柱
提取带电荷的样品
1、活化:以3-5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱
2、上样:以较低的流速,使样品均匀通过萃取柱
3、清洗:5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱
4、洗脱:将被测样品,用1-5毫升高离子强度的缓冲液洗脱至收集容器
固相萃取柱的正确使用步骤是什么呢？
一、参考固相萃取柱的类型及应用，选择适当的填料类型，然后选择固相萃取柱的大小和填料量。
反相、正相和吸附类型的过程：被萃取样品的质量不超过柱中填料量的5%，也就是说，如果您用100毫克/1ml的固相萃取柱，分析物质不超过5毫克。
离子交换过程：您必须考虑离子交换的容量：SAX和SCX其吸附剂容量为0。2毫当量/克。
第二、选择好萃取柱后，按步骤进行萃取过程：正相类型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所在的溶剂来预处理。离子交换填料将用于非极性溶剂中的样品，其用3-5ml的去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。为了使固相萃取填料从预处理到样品加入时都保持湿润，允许大约1毫升的预处理溶剂在管过滤片（frit）或萃取片表面之上。如果样品是从一个贮液管或过滤管引入固相萃取管，则多加入0。5毫升的预处理溶剂到1毫升的固相萃取管中，如果是2毫升到3毫升的萃取柱中，多加入4升到6毫升管中等等。这是为了保证在样品加入之前萃取柱湿润。如果在样品加入之前，萃取柱中的填料干了，重复预处理过程。在重新引入溶剂之前，用水冲洗柱中缓冲溶液的盐。
固相萃取柱操作问题
1、装柱柱子下的活塞避免使用润滑剂，以免被淋洗剂带到产品中。干法和湿法装柱区别较小，只要能把柱子装实即可。装柱前应仔细观察固相萃取柱是否开裂，避免影响分离效果，装柱应该要适度紧密（太紧密淋洗剂流速太慢，太疏松淋洗剂流速过快）、均匀（避免样品从一侧斜着流出），避免过柱时出现大量的气泡。
2、加样用少量的溶剂溶样品加样，打开活塞，待溶剂层下降至石英砂面时，再加少量的低极性溶剂，然后再打开活塞，如此三次，一般石英变成白色。加入淋洗剂后不可立即加压，等溶样品的溶剂和样品层有分开2cm～4cm，再加压，这样可以避免溶剂夹带样品下行。
3、样品的收集用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡过程。如果样品与硅胶的吸附较强，样品解析较慢。这样就会出现后面的点先出，而前面的点后出的现象，这时可以采用氧化铝作固定相。另外，收集的试管大小要以样品量而定，特别是小量样品，如果用大试管，可能一根就收到了多个样品，如果都用小试管，缺点是工作量太大。
4、处理萃取柱分离后，由于使用了大量的溶剂，其中的杂质也会积累到所需组分中，必要时进行重结晶。另外，过柱时有时会出现气泡，这可能存在两种原因：一是这与使用的溶剂类型有关，如果是易挥发的溶剂，在室温稍高的情况下，很容易出现这种现象。因此，在室温高的时候，应该选择沸点较高，挥发性相对小的溶剂。使用混合溶剂时，使用的两种溶剂的沸点相似。二是在装柱之前，柱内可能存有少量空气，必须用加压的方式将空气排干，这样就可避免柱中存有空气。
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