亲和柱原理介绍
亲和层析(IAC)可称为色谱技术,是一种利用抗原特异性可逆结合特性的SPE技术,根据抗原的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将抗、惰性微珠共价结合,然后装入小柱,将被测溶液流过亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,然后用洗脱缓冲液洗脱抗原(被测物),从而得到纯化的抗原(被测物),收集的抗原样品液可直接用于 HPLC 分析或处理后用荧光光度计
肝素亲和柱报价
亲和柱原理介绍
亲和层析(IAC)可称为色谱技术,是一种利用抗原特异性可逆结合特性的SPE技术,根据抗原的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将抗、惰性微珠共价结合,然后装入小柱,将被测溶液流过亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,然后用洗脱缓冲液洗脱抗原(被测物),从而得到纯化的抗原(被测物),收集的抗原样品液可直接用于 HPLC 分析或处理后用荧光光度计检测。
亲和柱的应用
应用:牛奶中M1的测定
(参考方法GB 541337-2010 食品安家标准 乳和乳制品中M1 的测定)
样品前处理
称取50g牛奶到具塞离心管中,在水浴中加热到35-37℃,4000转离心15min,除去上层乳脂,全部样品待过柱净化
样品过柱净化
1. 将亲和柱(SBHL-20-0245)连接于10ml或50ml注射管下。
2. 将处理好的样品全部通过亲和柱,控制试样以2mL/min-3mL/min稳定的流速过柱。(注意:空气不能通过柱体)
3. 以稳定的流速淋洗柱子两次,弃去全部流出液,并使2mL-3mL空气通过柱体。
4. 洗脱,流速为1mL/min-2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。
亲和柱——亲和层析的用途
简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。
亲和层析常见的用途是纯化重组蛋白。亲和层析是从粗混合物中纯化蛋白质或核酸的较佳选择。如果蛋白质的分子量,疏水性,电荷等未知,亲和色谱法仍可适用于这种情况。一个典型例子是尝试分离具有特定活性的酶时,可以用与所选底物相似或相同的连接配体构建亲和柱。

(作者: 来源:)