实验动物各种体液、的采集方法
消化液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。
2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分
动物实验
实验动物各种体液、的采集方法
消化液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。
2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。营养不良性gan硬化动物模型(1)fu制方法离乳雄性大鼠,每日喂食缺乏dan碱的低蛋白高脂肪饲料8~10g,连续2~3个月。这种方法可以收集到较纯净的唾液。
(二)胃液
1. 直接收集胃液法 急性实验时,先将动物,将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一,用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。(四)化学药品涂染动物被毛法:经常应用的涂染化学药品有涂染红色:0。如是大鼠,需手术剖腹,从幽门端向胃内插入一塑料管,再由口腔经食道将一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理盐水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,进行分析。
2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分,缝合起来形成小胃,主胃与小胃互不相通,主胃进行正常消化,从小胃可收集到纯净的胃液。模型实验只是一种间接性研究,只可能在一个局部或几个方面与人类疾病相似。应用该法,可以待动物恢复健康后,在动物清醒状态下反复采集胃液。
(三)胰液和胆汁
在动物实验中,主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。但本模型(犬)在测定肺功能时表明,动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例,同时病理组织学也证实动物气道萎缩,气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管,在其入肠处插管固定,并在近肝门处结扎和另行插管,可分别收集到胰液和胆汁。
有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。
实验动物如何选择?这个问题对于药理和实验动物的朋友来说,不是难事。但对于需要做动物实验的其它的朋友来说,有时候会感到茫然。或者没有自己的思考,照抄别人的做法。
对于这一部分站友,我们不可能要求去系统学习《医学实验动物学》,但我们可以常备一本在身边。在需要用的时候翻一翻,将会使你豁然开朗。切除之shen组织称重,以右shen重量减去所切除的左shenshen组织重量来间接估算残余shen重量,并算出切除率。因为书中比较详细地介绍了常用实验动物的解剖生理、生物学习性等等,主要的是它为你选择什么样的实验动物提供了重要的参考。
因此,系统学习或者零星地翻阅《医学实验动物学》是保证合理选用实验动物的基础之一。再者就是要参考大量文献。

大动脉转位致紫绀型心脏病动物模型
【造模方法】 体重为1.5~2.0kg雄性新西兰兔,按30mg/kg体重的剂量经耳缘静脉注射硫喷妥钠麻l醉,然后每隔30min静脉注射3~5mg/kg体重的剂量维持麻l醉。动物行仰卧位固定,前胸部皮肤常规去毛后消毒,作前正中无菌手术切口,切开皮肤、皮下组织及肌层,于第6、第7肋间水平横断胸骨,延正中线向上剪开胸骨,撑开器撑开,剪开心包,暴露心脏,注意保持纵隔胸膜的完整。游离肺动脉后,用4号丝线双活结结扎左心耳根部以阻断血流,于左心耳内注入1%肝素,用侧壁钳钳夹肺动脉左侧壁,在与左心耳对应部位剪开4~5mm的切口,用8/0的无损伤尼龙缝合线将肺动脉与左心耳侧侧吻合,先连续外翻缝合后壁,再间断外翻缝合前壁。缝线打结前排尽空气,先松开左心耳根部的结扎线,再缓慢松开肺动脉上的侧壁钳。生理盐水冲洗胸腔,置入硅胶引流片,关胸。术后每日肌肉注射青l霉l素40万U以预防感l染,共5d,术后3d拔取引流条。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。手术当中观察左心耳的颜色变化。于术后第4周,麻l醉,经腹l股l沟处切口l,l暴露股动脉,抽血测定pH值、氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)、氧饱和度(SaO2)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞比容(Hct)。采血后处死动物,观察心脏及吻合情况。术中吻合完成时可见左心耳颜色明显变暗,术后4周处死动物可见双心室轻度扩大,以右心室明显,吻合口通畅,直径为3~4mm,吻合口处光滑。术后1周动物的PO2、SaO2明显降低。术后第4周,PO2和SaO2的降低程度有所减小,考虑是代偿的原因。注意吻合口的大小要严格控制在4~5mm,太大时,严重的低氧会造成动物早期死l亡;太小时,有不能满足实验的要求,且容易形成血l栓而堵塞吻合口。
阿尔兹海默症(AD)模型
1.材料
SAMP8(老年化老鼠)小鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司)
昆明小鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司)
一次性(龙康鑫,001)
Aβ25-35(sigma公司)
脑立体定位仪(瑞沃德生命科技有限公司)
微量进样器(上海高鸽工贸有限公司)
2.造模方法
2.1老化模型:老化模型(SAMP8)
小鼠6月龄出现出现空间记忆障碍
2.2至损伤型动物模型:β-AP模型(侧脑室注射Aβ25-35)
选用昆明小鼠(20g-30g),Aβ25-35溶于无菌生理盐水(1mM)中,并在使用前在37℃培养7天聚集。将聚集的Aβ25-35注射到侧脑室室,坐标如下:AP: -0.5 mm,L/R : 1.0 mm,D:-2.5
mm(每次注射10 nmol 3μl生理盐水)。(PMID: 22989295)
3、实验结果
假手术组:海马形态正常,排列整齐,胞核清楚,细胞浆染色均匀,包膜完整,核仁清楚。
模型组:海马区细胞排列混乱,胞核固缩,细胞形态不规则。
(作者: 来源:)