武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向提供的生物技术服务。令人关注的是,大约一半的蛋白在1个以上的细胞区室中发现到,这揭示出一群相同的蛋白存在于细胞中的功能上不相关的部分。
亚细胞定位服务
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向提供的生物技术服务。令人关注的是,大约一半的蛋白在1个以上的细胞区室中发现到,这揭示出一群相同的蛋白存在于细胞中的功能上不相关的部分。
亚细胞定位技术服务客户提供:
1、基因序列由我们来全基因合成。
2、载体,我们扩菌后再PCR构建表达载体。
3、表达载体,我们转化农注射、转染拟南芥、原生质体。
亚细胞定位是指某种蛋白或某个基因表达产物在细胞内的具体存在部位,包括细胞核、细胞质和细胞膜等部位。传统的实验方法有,利用一些荧光蛋白如GFP、YFP,通过其在激光照射下发出的绿色或黄色荧光,从而准确确定编码蛋白的定位。如果面对质谱打出来很多蛋白,传统的实验方法显得十分乏力。如果能利用生物信息学手段基于一些算法如机器学习等开发的方法进行亚细胞定位预测分析辅助于实验,这样就能省时省力节约成本。进而促进了人类细胞图谱(HumanCellAtlas)项目的大胆落实。
原理:构建编码目bai标蛋白和荧光蛋du白的融合蛋白的载体,转染细胞,表zhi达,然后激光共聚焦显微镜dao观察荧光信号所在位置,即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意做空载荧光蛋白的对照。
具体步骤:构建目标蛋白与GFP的融合蛋白的瞬时表达载体,基因枪轰击洋葱内表皮细胞,或化学(PEG)转化原生质体,瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置,当然激光共聚焦图片会更漂亮。
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