ELISA试剂盒的试验原理
试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
以上就是关于ELISA试剂盒的相关内容介绍,
玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒公司
ELISA试剂盒的试验原理
试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
以上就是关于ELISA试剂盒的相关内容介绍,如有需求,欢迎拨打网站上的热线电话!
ELISA试剂盒——会出现的问题及解决办法
阴性标准品的吸光值阳性标准品的吸光值。
a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。
解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀。
b.原因:洗板过程发生问题。
解决办法:请随时监控洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。
c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。
解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。
Elisa试剂盒技术原理
(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面a的抗原或仍保持其活性。
(3). 酶标记的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或起反应。再加入酶标记的抗原或,也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以反应为基础,将抗原、的特异性反应与酶对底物的有效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
重复性不佳,高CV值
1 样品不均一 加样前充分混匀样品,取样确保移液位置一致;
2 包被板表面遭到破坏 洗板加样时尽量小心,避免破坏板的包被表面
3 孔与孔之间的交叉污染 孵育后取下盖子小心操作,避免孔与孔的污染;封板膜不能重复使用
4 加样量不一致 样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴
5 边缘效应(外周孔显色较中心孔深) 孵育时尽量100 rpm旋转混匀
6 微量加样不准确 保证微量加样的准确性和均一性
7 不正确的洗涤 洗液准确配制;充分洗涤,静置15秒,确定每一步的洗涤
(作者: 来源:)