1.人ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其中的antibody或抗原）与固相载体表面的抗原或antibody起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原antibody复合物与液体中的其他物质分开。
2.再加入酶标记的抗原或antibody，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
3.加入酶反应的底物后，底物
石蜡去除试剂
1.人ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其中的antibody或抗原）与固相载体表面的抗原或antibody起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原antibody复合物与液体中的其他物质分开。
2.再加入酶标记的抗原或antibody，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
3.加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
4.由于酶的催化效率很高，间接地放大了免1疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定antibody。
5.然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
ELISA定性测定
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或antibody作出'有'或'无'的简单回答，分别用'阳性'、'阴性'表示。'阳性'表示该标本在该测定系统中有反应。'阴性'则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中，将标本作一系列稀释后进行试验，呈阳性反应的zui高稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断标本反应性的强弱，这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。
在间接法和夹心法ELISA中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。
棉花等酚类、多糖类物质较多的植物ＤＮＡ提取法：
1 取2ｇ新鲜幼嫩的叶片放入研钵中,加入液氮后、充分研磨,待成极细的粉末状时迅速转入到50ｍｌ离心管中。
2 在50ｍｌ离心管中加入10ｍｌ冰预冷的提取缓冲液,在涡悬振荡器上充分混匀。
3 于4℃,2700×ｇ离心20分钟,倒去上清液。
4 在沉淀中加入5ｍｌ裂解缓冲液,在涡旋振荡器上充分混匀
。
5 于65℃水浴锅中温育30ｍｉｎ。
6 加入5ｍｌ氯1仿/异戊1醇(24/1),并上下翻转以充分混合。
7 于4℃,2700×ｇ离心5分钟。
8 转移上层水相至一新的50ｍｌ离心管中。
9 重复步骤7-9一次。
10 加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇,并上下翻转以充分混合,至-20℃2ｈ。
11 于4℃,1200×ｇ离心10ｍｉｎ。
12 在一新管中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液,用玻棒将ＤＮＡ转入该管(如不能直接用玻棒缠出,可离心后倒出上清,再在其中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液),放置20ｍｉｎ后稍许离心,移走上清并吸出残存乙醇,室温干燥。
13 加入1 0ｍｌＴＥ(10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌＰＨ=8 0,1ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ)并加入终浓度为20(ｇ/Ｌ的ＲＮａｓｅＡ,过夜。
14 风干,用50μｌＴＥ缓冲液溶解,存于-20℃备用。
鼻咽拭子的采集
被采集人员需要 保持头部不动，采样人员去除鼻腔内壁的分泌物。然后采样人员一手轻扶被采集人员头部，一手将鼻咽拭子缓缓插入鼻腔至鼻咽部。在鼻咽部，拭子将停留数秒吸取分泌物，而后采样人员轻轻旋转取出拭子，将样本保存并送检。
咽拭子的采集
被采集人员先用 生理盐水漱口，采样人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润。被采集人员头部微仰并保持不动，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧咽扁桃体，采集人员将拭子越过舌根，在被采集者两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次。
需要注意的是，两种采集方法， 被采集人员均会稍感不适，所以在采样的过程中，被采集人员需稍稍克服一下不适感， 配合采样人员的工作。不可过度活动头部，以免拭子划伤粘膜。如被采集人员发生刺激性咳嗽，采集过程需稍作暂停。
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