ELISA试剂盒的分类
检测范围和灵敏度不同,用量少时,可使用分装,前期是它的长久性不是很好。
试剂盒的标准曲线高点OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。
试剂盒重复性好,板内、板间变异系数均<9 %。
试剂的组份都多给20%的富余量,确保完成48/96孔的检测,避免分次检测可
酶联ELISA试剂盒公司
ELISA试剂盒的分类
检测范围和灵敏度不同,用量少时,可使用分装,前期是它的长久性不是很好。
试剂盒的标准曲线高点OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。
试剂盒重复性好,板内、板间变异系数均<9 %。
试剂的组份都多给20%的富余量,确保完成48/96孔的检测,避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。
检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作,保证实验结果的重复性。
ELISA试剂盒——ELISA实验通用规则
1、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
2、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
3、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
4、底物是光敏感的,要在临用前现配。
5、检测前,要打开酶标,使之稳定10分钟以上。
6、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
7、待检样品要澄清,否则会影响结果。
8、温浴时间应遵守试剂盒规定。
9、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
ELISA试剂盒——会出现的问题及解决办法
标准曲线线性不佳,或是平行性不好。
a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。
解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。
b.原因:操作时间拖太久。
解决办法:请在方法熟练后再进行操作。
c.原因:微孔间相互污染。
解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。
解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。
e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。
解决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。
f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。
解决办法:请随时监控洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。
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