细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。
加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。
iPS细胞
基本概念:
人iPS细胞相关
细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。
加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。
iPS细胞
基本概念:
诱导多能iPS细胞(induced pluripotent stem cells, iPS cells )起初是日本人山中申弥( ShinyaYamanaka)于2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4, Sox2, KIf4和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中,使其重编程而得到的类似胚胎iPS细胞的一种细胞类型。随后世界各地不同科学家陆续发现其他方法同样也可以制造这种细胞。
细胞可分为全能iPS细胞、多能iPS细胞和单能iPS细胞,诱导多能iPS细胞即通过向体细胞幄入诱.
导基因,使体细胞重编程获得具有胚胎iPS细胞样特性的多能iPS细胞,也称为去分化。
iPS细胞与胚胎ES形态相似、核型、端粒酶活性、体外分化潜能均相同,同时也能够表达相同的表面标志分子。ES细胞和IPS细胞具有相同的基因。不同的是,ES细胞中的与细胞多能性有关的基因能够表达,如:oct4,Sox2等。而已分化的体细胞中的这些基因不能表达。通过导入与多能性有关的外源基因来唤醒体细胞中的多能性基因,从而使体细胞从分化状态重编程为多能性iPS细胞。

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