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遂宁细胞实验室常规及特殊染色「在线咨询」

细胞增殖检测 本公司应用MTT比色法, 检测细胞存活和生长。5、CellTrackerTMGreen染色:主要用于双染色,但其能染所有的液泡,故也属于非特异性的。其检测原理为huo细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源性无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二jia基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的Formazan,用酶联m
细胞实验室







细胞增殖检测

本公司应用MTT比色法, 检测细胞存活和生长。5、CellTrackerTMGreen染色:主要用于双染色,但其能染所有的液泡,故也属于非特异性的。其检测原理为huo细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源性无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二jia基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的Formazan,用酶联mian疫检测仪在一定波长处测定其光吸收值,可间接反映huo细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿liu药wu筛选、细胞毒性试验、以及肿liu放she敏感性测定等。干细bao培养诱导分化干细bao是一类具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞,理论上具有无限分裂能力,在特定条件下,可分化成特定组织。服务内容 1. 细胞接种:收到客户细胞后,我们会用细胞计数板计数细胞,得出细胞悬液浓度。计算出应稀释的倍数,按MTT试剂盒要求在96孔板内接种 相应浓度的细胞悬液;

2. 细胞培养:然后在无菌恒温细胞培养箱内培养接种好的96孔细胞培养板,并实时观察细胞状态;

3. yao物处理并呈色:按不同浓度梯度加入yao物作用细胞;

4. 溶解,比色:加入MTT检测试剂,按操作要求孵育相应时间,在mei标仪内检测对照组和实验组的吸光值。并处理数据得出比色结果。






yao物对细胞的IC50检测

IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。目前,已报道的自ES细胞诱导分化的细胞主要包括胰岛细胞、造血细胞、肝细胞、神经细胞、脂肪细胞、心肌细胞、内皮细胞、上皮细胞、成骨细胞、软gu细胞和黑素细胞等。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药wu诱导肿liu细胞凋亡50%,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量yao物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对yao物的耐受程度。









关于细胞培养的常见问题




Q:培养液到底要不要加双抗(青&链)?

A:双抗不是细胞生长必需的。我们培养细胞时不常规使用,因为连续使用会促进耐药性细胞株的产生,导致轻度污染持续存在。一旦将从培养液中去除,这种轻度污染终将发展成为大规模污染。具体情况,可根据自己实验室的环境,自行决定是否使用双抗。

Q:细胞培养,能更换成其它种类的培养基吗?

A:我们强烈建议好使用细胞提供机构或细胞库推荐的生长培养液。有些细胞可能会适应在不同培养基中生长,在做好保种的条件下,可以分出部分细胞做测试。










4. 各种细胞对冻存速度的要求也不一样;上皮细胞和成纤维细胞耐受性可能大些,-2~-3℃/ 分钟合适;胚胎细胞耐受性较小,不宜太快。总之在一开始时,下降速度不能超过-10℃/ 分钟。

5. 用什么防护剂合适和用量多大,要依细胞而定,初代培养细胞用 DMSO 较好,一般细胞可用甘油;用量以较小为好。有人认为肤上皮细胞贮存在 20%-30% 甘油中很好。

6. 原则上细胞在液氮中可贮存多年,但为妥善起见,冻存一年后,应再复苏培养一次,然后再继续冻存。

7. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免

8. 注意自身的安全,对于来自人源性或病毒的细胞株应特别小心。操作过程中,应避免引起气溶胶的产生,小心有毒性试剂例如 DMSO,并避免尖锐物品伤人等。






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