小分子类物质包含多肽、天然小分子、化学合成小分子等一系列的物质，被广泛用于medicine等各个领域。以往小分子的定量检测主要通过气相和液相色谱完成，存在周期长，检测仪器价格昂贵等多方面的不足。那么immune检测技术可以用于定量检测小分子吗？
免1疫检测试剂盒的技术基础就是抗原和抗1体的特异性结合，小分子特异性抗1体的制备即是小分子immune检测试剂盒制备的关键之
核酸共沉剂
小分子类物质包含多肽、天然小分子、化学合成小分子等一系列的物质，被广泛用于medicine等各个领域。以往小分子的定量检测主要通过气相和液相色谱完成，存在周期长，检测仪器价格昂贵等多方面的不足。那么immune检测技术可以用于定量检测小分子吗？
免1疫检测试剂盒的技术基础就是抗原和抗1体的特异性结合，小分子特异性抗1体的制备即是小分子immune检测试剂盒制备的关键之处。小分子由于分子量小，结构简单，在免1疫学上划归为半抗原（Hapten），即只有immune反应性而没有immune原性的一类物质，不能直接刺激机体产生antibody但是却拥有和antibody结合的特性。随着抗1体制备技术的发展，小分子特异性抗1体的制备技术显得更为多元化
选择素elisa试剂盒的实验原理
选择素elisa试剂盒是一类异亲型结合、Ca2+依赖的细胞粘着分子，能与特异糖基识别并结合。主要参与白细胞与血管内皮细胞之间的识别与粘着。
实验原理：
将目标包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入品或标本，其中的目标连接于固相载体上的结合，然后加入微生物化的目标，将未结合的生物素洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶1标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。
精密度：精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100
批内差：取同批次选择素elisa试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差： CV<10% Inter-批间差： CV<13%
经测定，试剂盒在X期内按推荐温度保存，其活性率小于5%。为减小外部因素对试剂盒前后检测值的影响，实验室的条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可人为误差。
选择素elisa试剂盒识别的配体都是一些寡糖基团，迄今为止发现的配体都是一些具有唾液酸化路易斯寡糖(s-Le，siaglyl-Lewis)或类似结构的分子。一种寡糖基团可以存在多种糖蛋白和糖脂分子上，并分布于多种细胞表面，因此选择素分子配体在体内分布较为广泛。
植物ＤＮＡ的ＣＴＡＢ提取法：
1 称取新鲜叶片2-3ｇ,剪碎放入研钵中,在液氮中研磨成粉末。
2 将粉末转移到的加有7ｍｌ经预热的1 5×ＣＴＡＢ提取缓冲液15ｍｌ离心管中,迅速混匀后置于65℃水浴中,温育30ｍｉｎ。
3 取出离心管,冷却至室温,加入氯1仿/异戊1醇(24:1),充分混匀,室温下2300×ｇ离心20ｍｉｎ。
4 将上清转移至另一新的15ｍｌ离心管中,加入1/10体积10%的ＣＴＡＢ和等体积的氯1仿/异戊1醇。充分混匀,2300×ｇ离心20ｍｉｎ。
5 转移上清至另一新的15ｍｌ离心管中,加入等体积1%的ＣＴＡＢ沉淀缓冲液,轻轻摇晃至形成ＤＮＡ絮状沉淀。1000×ｇ离心10ｍｉｎ,使ＤＮＡ沉淀于管底。
6 加入1 5-2ｍｌ的1ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ及5μｌＲＮａｓｅ置于56℃水浴中过夜。待ＤＮＡ完全溶解后,加2-3ｍｌ4℃预冷的95%的冰乙醇使ＤＮＡ沉淀,挑出ＤＮＡ,置于1 5ｍｌ离心管中,用70%乙醇清洗30ｍｉｎ,用离心机甩5ｓ,倒出70%乙醇,再用95%乙醇浸泡5ｍｉｎ,倒出95%乙醇,在超净工作台上吹干。
7 将风干的ＤＮＡ直接在4℃保存备用或溶于100μｌＴＥ溶液中于-20℃保存。
棉花等酚类、多糖类物质较多的植物ＤＮＡ提取法：
1 取2ｇ新鲜幼嫩的叶片放入研钵中,加入液氮后、充分研磨,待成极细的粉末状时迅速转入到50ｍｌ离心管中。
2 在50ｍｌ离心管中加入10ｍｌ冰预冷的提取缓冲液,在涡悬振荡器上充分混匀。
3 于4℃,2700×ｇ离心20分钟,倒去上清液。
4 在沉淀中加入5ｍｌ裂解缓冲液,在涡旋振荡器上充分混匀
。
5 于65℃水浴锅中温育30ｍｉｎ。
6 加入5ｍｌ氯1仿/异戊1醇(24/1),并上下翻转以充分混合。
7 于4℃,2700×ｇ离心5分钟。
8 转移上层水相至一新的50ｍｌ离心管中。
9 重复步骤7-9一次。
10 加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇,并上下翻转以充分混合,至-20℃2ｈ。
11 于4℃,1200×ｇ离心10ｍｉｎ。
12 在一新管中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液,用玻棒将ＤＮＡ转入该管(如不能直接用玻棒缠出,可离心后倒出上清,再在其中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液),放置20ｍｉｎ后稍许离心,移走上清并吸出残存乙醇,室温干燥。
13 加入1 0ｍｌＴＥ(10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌＰＨ=8 0,1ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ)并加入终浓度为20(ｇ/Ｌ的ＲＮａｓｅＡ,过夜。
14 风干,用50μｌＴＥ缓冲液溶解,存于-20℃备用。
-->
