等温核酸试剂盒
RNA试剂盒使用方法
使用时一定要根据自己的实验需要购买提取试剂盒, 如果不是试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析等后续实验的结果。
当前提取效果好的是QIANGEN公
TwistAmp basic价格
等温核酸试剂盒
RNA试剂盒使用方法
使用时一定要根据自己的实验需要购买提取试剂盒, 如果不是试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析等后续实验的结果。
当前提取效果好的是QIANGEN公司生产的RNA提取试剂盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大,对精度要求不高的实验没有必要购买,当然还有其它的进口试剂盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题(如果碰上国内无货的时候,要从国外发货,会等很长一段时间)。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货,如天根(目前国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种)等,其价格比进口试剂盒要便宜许多,且效果还不错,还可以。
当然,就RNA的提取而言,不一定试剂盒的提取效果就非常好,其实采用一些经典的RNA提取方法,效果也很不错,如:TRIZOL、EDTA等,只是试剂盒使用方便,经典的方法操作复杂一些。
重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是2006年由英国科学家研发的一种核酸恒温扩增技术。它是利用多种酶参与,在体外模拟生物体内DNA复印,恒温条件下短时间内实现靶基因大量扩增,既可以扩增DNA,也可以扩增RNA。RPA技术具有恒温、、便携、灵敏度高、特异性强和操作简单等优点,是目前很有望替代PCR技术的核酸等温扩增方法,在基层现场诊断中,具有广阔的应用前景。
相对来说RPA是很好的恒温扩增法,可在较低温下恒温扩增,不需要复杂仪器设备,操作简单、反应时间短,特异性好、灵敏度高,可采用电泳、荧光、侧向流试纸等多种方式检测扩增产物
核酸试剂盒的原理
核酸检测,其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。现在核酸检测试剂盒(多重荧光RT-PCR法),能够实现一小时诊断。
根据锐科技发布的文章《如何进行核酸检测带你揭秘全过程》,目前的病毒核酸检测试剂盒,多数采用荧光定量PCR方法。检测原理是以病毒的基因序列为检测靶标,通过PCR扩增,使我们的选择这段靶标DNA序列指数级增加,每一个扩增出来的DNA序列,都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的靶基因越多,累计的荧光信号就越强。
PCR,即聚合酶链式反应,是对待检测样本中的核酸进行扩增的一种方法。荧光PCR法,又称qPCR法(Quantitative Real-time PCR, qPCR),是生物分子荧光技术发展的产物,即指在核酸扩增反应的过程中,加入以荧光化学物质,并以荧光强度来测定PCR循环后产物中核酸水平。
荧光PCR的概念于1992年被日本科学家提及,并在4年后由美国公司ABI实现产业化。如今,ABI公司在荧光定量PCR仪制造界的地位仍不可撼动,其三代产品ABI 7500 Real-time PCR system是使用很广泛的荧光定量PCR仪。
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