yao物对细胞的IC50检测
IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药wu诱导肿liu细胞凋亡50%,该浓度称为5
细胞毒性实验
yao物对细胞的IC50检测
IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药wu诱导肿liu细胞凋亡50%,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量yao物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对yao物的耐受程度。3D细胞培养3D多细胞肿liu球是在体外应用组织培养方法使肿liu细胞以多细胞集聚体的形式生长成为具有三维结构的球体。
细胞培养中常见的污染及解决方法
黑点污染
黑色的游动点能穿透滤膜并在空气中扩散。它们在低倍镜下显示为黑色圆点,在高倍镜下显示为可移动的黑点。培养液也不浑浊,一般影响较小,因此细胞仍可使用。G,过表达慢病毒系统使用pLVX-AcGFP、psPAX2、pMD2。通常,黑点污染后,细胞生长良好,运动物体无明显增加,培养基的颜色和透明度无明显变化。在同一批培养的细胞中也可以发现类似的现象。
解决方法:黑点对细胞生长状态没有明显影响,细胞增殖后会自然消失,因此除了置换外,无需特殊处理。如果细胞可能被小的运动点污染,建议增加培养皿细胞密度,以提高细胞存活率。
Q:中可能出现的沉淀物是什么?
A:基于多年的实验研究,用于细胞培养的胎牛以及其它中可能会存在以下种类的沉淀物:
(1)纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到 1-2mm,可以用肉眼观察到。因为都是在低温下进行收集和处理的,一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)在处理过程中仍然处于溶解状态,当经过的过滤分装后,就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。滴度检测:将病毒颗粒使用梯度稀释,分别293T细胞,72h后,在荧光显微镜下观察细胞荧光表达情况。
(2)磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使出现浑浊,并且在 37℃ 培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点, 这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。
(3)胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是中出现沉淀物的常见原因。

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