GTPases的Rab家族调节真核水泡膜运输。 Rab35与两个血浆
膜和内体定位,并涉及到包括T细胞受体回收,卵母细胞卵黄蛋白回收和胞质分裂在内的各种过程。 Rab35调节神经元样细胞中的神经突生长,并可以诱导突起。
当前没有直接测定法来测量Rab35 GTPases的活化。
NewEast Biosciences Rab35激l
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GTPases的Rab家族调节真核水泡膜运输。 Rab35与两个血浆
膜和内体定位,并涉及到包括T细胞受体回收,卵母细胞卵黄蛋白回收和胞质分裂在内的各种过程。 Rab35调节神经元样细胞中的神经突生长,并可以诱导突起。
当前没有直接测定法来测量Rab35 GTPases的活化。
NewEast Biosciences Rab35激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆
特异性识别Rab35 GTP而不识别Rab Rab35 GDP的抗l体。鉴于...的高度亲和力
抗原的单克l隆抗l体,可以在短时间内进行激l活测定。这个
分析提供了可靠的结果,并具有一致的可重复性。
这些抗Rab35 GTP单克l隆抗l体也可以用于监测大鼠Rab35的激l活。
1细胞和组织中的免l疫组织化学。
NewEast Biosciences Rab35激l活检测试剂盒提供了一种简单的方法来监测
Rab35的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。
电泳和转移
1向聚丙l烯酰胺凝胶(17%)中加入15μL/孔的下拉上清液。而且
建议包括预染色MW标准(作为成功转入的指标步骤3)。
2按照制造商的说明进行SDS-PAGE。
3按照制造商的说明,将凝胶蛋白转移到PVDF或硝化纤维膜上
说明。
免l疫印迹检测(所有步骤均在室温下搅拌)
1在电印迹步骤之后,将PVDF膜浸入甲l醇中15次
然后在室温下干燥5分钟。
如果使用硝基纤维素,则应跳过此步骤。
2室温下用5%脱脂奶粉或3%牛血l清白蛋白在TBST中封闭1小时
不断地搅动。
用抗Arl1单克l隆抗l体孵育,新鲜稀释1:50~1000
(取决于样品中Arl1蛋白质的含量)5%脱脂奶粉或3%
BSA/TBST,室温下持续搅拌1-2小时或4o
过夜。
3用TBST清洗吸水膜三次,每次5分钟。
4用二级抗l体(例如山羊抗鼠IgG,HRP结合物)培养膜,
在室温下,在5%脱脂奶粉或3%BSA/TBST中新鲜稀释1:1000,1小时
5用TBST清洗吸水膜三次,每次5分钟。
6使用您选择的检测方法,如ECL。
Arl1激l活试验。纯化的GST标记的Arl1蛋白用
抗活性Arl1单克l隆抗l体(Cat。#26924)用GDP(车道1)或GTPγS(车道2)处理后,用抗Arl1单克l隆抗l体(Cat)进行印迹。#26056年)。显示Arl1蛋白输入控制在底部面板中。
产品描述
Arf样蛋白1(Arl1)是调节性gtpase家族中的一员,位于Ras中
GTPases的超家族,在真核生物中具有高度保守的同源基因。Arl1至关重要用于果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育。Arl1在一级序列,细胞位置和功能(膜交通的调节)到Arf1–6甚至共享几个共同的有约束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高尔基/跨高尔基网络,有报道表明Arl1可能在离子稳态中起作用酵母。
目前还没有直接测定Arl1-gtpase活性的方法。
NewEast Biosciences Arl1激l活检测试剂盒是基于特定构型的单克l隆抗l体特异性识别Arl1 GTP,但不识别Arl1 GDP的抗l体。鉴于单克l隆抗l体对其抗原,活化试验可在