1.抗活性Arf 6,小鼠单克l隆抗l体(货号26918):一小瓶– 22 μL(1
含50%甘油和0.05%叠氮l化钠的PBS(pH 7.4)中的浓度(mg / ml)。 该抗l体特异性识别所有脊椎动物的Arf 6-GTP。
2.蛋白A / G琼脂糖(目录号30301):一小瓶– 400 μL 50%浆液。
3. 5X测定/裂解缓
重组人Ran 蛋白
1.抗活性Arf 6,小鼠单克l隆抗l体(货号26918):一小瓶– 22 μL(1
含50%甘油和0.05%叠氮l化钠的PBS(pH 7.4)中的浓度(mg / ml)。 该抗l体
特异性识别所有脊椎动物的Arf 6-GTP。
2.蛋白A / G琼脂糖(目录号30301):一小瓶– 400 μL 50%浆液。
3. 5X测定/裂解缓冲液(目录号30302):一瓶– 30 mL的250 mM Tris-HCl,pH 8,750mM NaCl,50 mM MgCl2,5 mM EDTA,5%Triton X-100。
4.抗Arf 6,兔多克l隆抗l体(货号21032):一小瓶– 100 μL(1 mg / ml)
pH 7.4的PBS中含有50%的甘油。
5. 100 XGTPγS(目录号30303):1瓶– 100 μl,10 mM,使用5 μLGTPγS标记0.5 mL细胞裂解液。
6. 100 X GDP(产品目录号30304):一个样品瓶– 100 μl,100 mM,使用5 μL GDP标记0.5 mL细胞裂解物。
Arl3(类似Arf的3)是一种ADP-核糖基化因子(Arf)家族蛋白,在N端延伸方面不同于大多数Arf家族成员。 Arl3的核苷酸交换是的,并且与脂质和去污剂无关。 与GDT / GTP结合后,Arl3与一系列效应蛋白相互作用,并调节这些效应蛋白的活性,例如人类视网l膜基因4(HRG4),cGMP磷酸二酯酶的δ亚基(PDEδ)和Arl2的结合物(BART)。 Arl3还以可调节的方式结合微管,以通过与色素性视网l膜炎2(RP2)相互作用来改变胞质分裂的特定方面。 有人提出,RP2与Arl3协同作用,将光感受器中的细胞膜和细胞骨架连接为细胞的一部分
9.收集上清液并在冰上存储样品(约1-2 mg总蛋白)以进行中间使用,或将其冷冻并保存在-70°C下以备将来使用。
试剂盒成分
特异性识别Cdc42活性构象的鼠单克l隆抗l体(Anti-active Cdc42, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)):小管装--30ul (抗l体浓度是1mg/ml),抗l体溶于PBS(pH7.4)并包含50%的甘油和0.05%的叠氮l化钠。此抗l体可以特异性识别所有脊椎动物中的Cdc42-GTP。
Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) :小管装—400ul包含200ul Protein A/G agarose 和200ul 20%乙醇溶液。(使用时溶液需要充分混匀,再吸取)
5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303):小瓶装—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0), 750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
特异性识别Cdc42活性构象的兔多克l隆抗l体(Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody (Catalog No.21010)):小管装--30ul (抗l体浓度是1mg/ml),抗l体溶于PBS(pH 7.4)并包含有 50%的甘油。
100 X GTPγS (Catalog No. 30302) :小管装—100ul (10 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用 5ul GTPγS标记。
100 X GDP (Catalog No. 30304) :小管装—100ul (100 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用5ul GDP标记。
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