广州硕谱生物科技有限公司,SPE小柱,是目前国内生产SPE小柱较好的生产厂家。固相萃取柱填料批发
常用极性固定相包括:硅胶、氧化铝、弗罗里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅胶。
正相态时,溶液体系的极性应按样品溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂的顺序递增,洗脱强度也随之递增。要确保所选的样本溶剂不会洗脱目标物,所选的淋洗液应在不洗脱目标物的前提
固相萃取柱填料批发
广州硕谱生物科技有限公司,SPE小柱,是目前国内生产SPE小柱较好的生产厂家。固相萃取柱填料批发
常用极性固定相包括:硅胶、氧化铝、弗罗里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅胶。
正相态时,溶液体系的极性应按样品溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂的顺序递增,洗脱强度也随之递增。要确保所选的样本溶剂不会洗脱目标物,所选的淋洗液应在不洗脱目标物的前提下,很大限1度地洗脱干扰物,这样洗脱目标物才能碰巧完全洗脱目标物。
因此,面对反相、正相固相萃取,在实际应用中应选择哪一种?鉴于大部分化合物都具有多种功能基团,在实际操作中,主要根据目标物和干扰物的性质考虑采用何种萃取机理。
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负离子交换填充物(SAX, MAX)
·分析物:阴离子(酸)化合物
·方法:
(a)活化:样品在非极性有机溶1剂中作活化处理时,可用样品溶剂:在极性溶剂中作样品处理时,可用水溶性有机溶1剂作活化处理,然后用水平衡,然后用合适 pH值的缓冲液平衡。
上样:样品溶液的 pH值应大于其 pKa的两个单位(以保证其电荷)。
洗脱液 pH值:洗脱液 pKa小于两个单位(中和分析物的电荷)。
反相分离柱C18的适用范围
C18反相分离柱广泛应用于天然产物的提取,药1物合成研究与开发,生物制药等领域。若样品极性偏大, Rf值非常接近,则不能分离正相模式;终产物要求纯度98%以上,采用正相模式达不到;样品在正相条件下存在溶解问题——不妨考虑采用反相C18模式分离。由于其填料粘合技术的成熟和良好的分离能力,C18柱已成为日常接触分离提纯研究人员zui多的反相柱。
反相式C18反相分离柱的主要参数
分离柱C18有多种参数,大致可分为四个方面:相键(包括修饰、封端)、填充载体(硅胶纯度、填充颗粒类型、粒径、孔径)、柱体本身(柱效、柱内径、柱长)和隐藏参数(比表面积、碳含量等)。小编想选择以下几个大家容易忽略的
反向作用机制:
反相萃取分离主要是利用固相萃取材料官能团与目标化合物碳氢键之间的非极性作用力。反相非极性的 SPE柱通常更适合从极性基质中提取分离出非极性和中等极性的目标化合物。
对利用非极性作用力吸附于非极性 SPE柱的目标化合物,可用氯1仿、环己1烷、乙1酸乙1酯等具有非极性的溶剂洗脱。当溶剂的洗脱强度足够大,可以使目标化合物与吸附剂非极性基团间的范德华力不受影响时,使其在 SPE柱中顺利洗脱。即使是极性更强的甲1醇,对许多化合物而言,也有足够的非极性力量来洗脱它。有时候,单种溶剂无法完全洗脱疏水性的目标化合物,可以考虑使用二氯甲1烷:乙1酸乙1酯(1:1,体积比)。
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一般来说,我们需要分离的混合物的性质各不相同,很难通过调整 PH来达到要求。一般而言,在改变流动相 PH的基础上,又加入缓冲盐以改变组分的选择性和分离程度。大多数C18反相分离柱在使用
一、强酸淋洗、强碱
用硅胶作载体的粘结相填料,其使用要求是:流动相 PH值在2.5-7.5之间。在 PH<2时,流动相可能与载体硅胶和合相发生水解反应,从而导致碳链损失;在 PH<7时,流动相可能使载体硅胶溶解。因此,硅胶基体C18 (即 ODS)在强碱条件下基本寿命较短,聚合体C18虽然能在高碱性条件下稳定工作,但其价格昂贵,分离性能及模组强度均不如 ODS。
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改进净化方式
在一般情况下,目标化合物模式比杂质模式的净化效果要好,如果要分析的是某种特定种类的化合物,则较好是用保留目标化合物的模式来分析;举一个简单的例子,也就是对蔬菜中的多菌灵和塞菌灵(一类碱性农1药)进行分析,用阳离子交换柱可专一性地保留这些农1药,使其与干扰物基本完全分离,而用正相吸附剂或石墨化炭黑进行保留干扰物的操作只能去除主要的干扰物,保留干扰物的数量较多。
此外,如果可以用多个 SPE柱对目标化合物进行净化,应选择选择性好的吸附剂;选择性越高,离子交换>正相>反相。
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在填充压实后, SPE小柱的填料形成柱床,当溶剂流过小柱时,速度过快会产生两个问题:一是对粘结相填料而言,由于流速过快,使其不能充分浸润舒展,从而导致其保留活性降低;二是过快的流速会使小柱形成沟槽,使小柱没有充分浸润,从而减少吸附填料与样品的接触面积,影响目标物质的传质过程,从而降低回收率。
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当柱流速度为0-3.0 mL/min时,由于横截面积较大,柱床