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蛋白结晶板

蛋白质分子的三维结构是生命科学研究中极为重要的信息,X射线单晶衍射技术是目前获得结构信息的手段,但如何筛选到个蛋白晶体是该技术必需的步,也是制约结构生物学发展的主要瓶颈问题之一.现在一般通过规模筛选的方法从众多的溶液中筛选出可结晶的条件,但是工作量较大,效率也不高.回顾了近年来在提高结晶筛选效率方向取得的成就。

蛋白结晶板使用

主要表现在2个方面:一是在传统结晶方法和试剂基础上发展起来的一系列新的的结晶技术和筛选试剂盒;二是从生物学,物理学和化学等角度提出的一些提高结晶筛选效率的新技术,主要包括通过分子工程改造蛋白,提高蛋白溶液的稳定和均一性,导入籽晶,共结晶,改善结晶界面和变温筛选等技术.展望了该领域未来的发展趋势。

蛋白质晶体板

半胱氨酸、赖氨酸的蛋白质、以及含有金属离子的蛋白质。这些蛋白质的吸附会导致重组蛋白质纯度大幅降低。为了解决这一问题,我们制备了两类新材料,用于提高重组蛋白质纯度:1)通过分子印迹技术,以组氨酸标签为模板,在IMAC材料表面形成组氨酸标签的分子印迹层,使得不含组氨酸标签的蛋白质无法靠近IMAC材料,从而提高重组蛋白纯度;2)通过活性可控自由基聚合,在IMAC基质材料表面包被了一层尺寸可控的聚合物涂层。在聚合物网络的筛分作用下,进而实现带组氨酸标签的重组蛋白的纯化。

温度控制作为调控蛋白质结晶过程的手段,在结晶实验中被广泛采用.热历史 效应作为蛋白质结晶实验中新的影响因素,已被越来越多的科学家所重视.控制温度可以改变蛋白质的溶解度,进一步改变溶液的过饱和度,从而影响结晶过程.我 们简要总结了温度对蛋白质结晶的影响及应用温度技术控制蛋白质晶体生长的各种技术,为蛋白质结晶工作提供理论和实验依据。

从溶液中聚集体的角度研究了溶液的热历史改变生长出的蛋白质晶体的数目和尺寸的内在原因.将在281和309 K下保存1 d的两组溶菌酶溶液按不同比例混合,加入沉淀剂生长晶体.随着高温溶液的比例增加。