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UPLC和HPLC的区别
与传统的高效液相色谱(HPLC)相比,UPLC具有高分离度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、高灵敏度(sensitivity)等优势。在全方面提升HPLC的速度、灵敏度和分离度诸的同时,保留其原有的实用性及原理。
其显著的优势是可以缩短
高效液相色谱方法
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视频作者:北京通恒科技有限公司
UPLC和HPLC的区别
与传统的高效液相色谱(HPLC)相比,UPLC具有高分离度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、高灵敏度(sensitivity)等优势。在全方面提升HPLC的速度、灵敏度和分离度诸的同时,保留其原有的实用性及原理。
其显著的优势是可以缩短分析时间,提高工作效率。
使用UPLC确实能明显缩短分析时间,提高了效率(如某有关物质分析方法,使用HPLC运行一针是75分钟,UPLC完全可以在10分钟内搞定),分析效率提高将近7.5倍。
当然了,分析效率提高这么多,其配套设备肯定也不是闹着玩的。UPLC需要小颗粒杂化填料(1.7um)的色谱柱、更高耐压(达15000Psi)、低系统体积的输液单元。
高效液相色谱仪
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。
1.进样系统
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的。
2.输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。
3.分离系统
该系统包括:色谱柱、连接管和恒温器等。
4.检测系统
高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种
5.数据处理系统
该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。
液相色谱柱的保存
1.反向色谱柱实验后的保养:
使用缓冲液或含盐的流动相,实验完后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
2.长期保存色谱柱:
如,色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下,对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水中,并将堵头堵上,储存温度尽量是室温。
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