蛋白结晶板方法
本发明涉及一种蛋白质结晶板,包括结晶板主体部分,以及在结晶板主体上以阵列形式分布的储槽单元,每一所述储槽单元具有一面板,在所述一面板中间位置形成一凹槽,所述凹槽底部为第二面板，在所述第二面板中间位置或靠近一侧的位置凹入形成一储槽,所述一储槽至少一侧的第二面形成有至少一个滴液槽,所述一面板与第二面板通过连接部连接,所述结晶板主体部分在其四周具有支撑部.本发明
96孔板公司
蛋白结晶板方法
本发明涉及一种蛋白质结晶板,包括结晶板主体部分,以及在结晶板主体上以阵列形式分布的储槽单元,每一所述储槽单元具有一面板,在所述一面板中间位置形成一凹槽,所述凹槽底部为第二面板，在所述第二面板中间位置或靠近一侧的位置凹入形成一储槽,所述一储槽至少一侧的第二面形成有至少一个滴液槽,所述一面板与第二面板通过连接部连接,所述结晶板主体部分在其四周具有支撑部.本发明还涉及一种利用上述结晶板进行蛋白质结晶的方法。
传统结晶板蛋白质晶体板比较
在20℃时虽然微流控芯片上的结晶条件数少于24孔结晶板(67 vs 94),但主要是嗜热菌蛋白酶的结晶条件数显著减少,其他4种蛋白在两种方法上均有相近的结晶条件数,表明微流控芯片能以接近24孔结晶板的效率进行蛋白质结晶筛选.但是,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有60%的结晶条件不同,20℃时有90%的结晶条件不同,这表明目前的这种微流控芯片还不能直接代替传统的24孔结晶板,它可以作为蛋白质结晶筛选时的一种补充方式。
蛋白质晶体板相互作用
蛋白质分子的结构层次蛋白中的多肽链往往不是一个如图4图4所示完全伸展的链。L.C.鲍林和R.B.科里曾由氨基酸、小肽和有关化合物晶体结构的测定中归纳了肽键的键长、键角等。链中肽键N-C的键长为1.32埃，具有40%的双键成分，与周围四个键是共面的，且N-H和C=O具有反式构型。肽键因具双键成分而无旋转的自由，但它周围的每个Cα原子与相邻两个肽键中的氮和碳原子所形成的Cα-N和Cα-C单键都具有较大的回旋余地，从而一个多肽键可能存在于不计其数的构象或立体结构中，其中有些构象使未成键原子间形成较多较强的氢键并产生其他能使整个分子趋于稳定的相互作用。
蛋白结晶板使用
蛋白质是水产品的主要组分,其含量测定在水产品加工及研究等方面应用极为广泛.目前,各蛋白含量测定方法通常是在试管中进行反应并应用分光光度计测定,其操作过程较繁琐,分析大批量样品时效率低,上述缺点在高通量筛选、检测等场合尤为突出.为了克服该不足,实现蛋白含量的高通量测定,本研究基于Folin-酚法,利用96孔板作为反应器并配合比色,建立了一种蛋白含量测定的微孔板方法并评价其合理性.该法测得样品的蛋白含量与常规法结果无显著性差异,反应在30-90 min显色稳定,标准曲线的线性相关系数R2=0.9922,标准偏差范围为0.07%-0.78%,检测限为10 μg.与常规法相比,微孔板法保持了Folin-酚法的准确性及稳定性,同时具有通量高、节省样品、试剂及测定时间等优点,在蛋白高通量测定方面更具优势。
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