武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;因此,可以通过加强蔗糖果糖基转移酶基因的表达来提高番茄果实中蔗果寡糖含量,培育出的富含蔗果寡糖的番茄果实具有很好的食用价值和发展前景。可以开展各类动、植
洋葱亚细胞定位方法
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;因此,可以通过加强蔗糖果糖基转移酶基因的表达来提高番茄果实中蔗果寡糖含量,培育出的富含蔗果寡糖的番茄果实具有很好的食用价值和发展前景。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
GaMYB2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因枪轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共聚焦显微镜下进行观察,从图A 中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根癌农介导将PnCHI1转入中过量表达。从图B 中发现GaMYB2-GFP 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;以拟南芥Col-0生态型基因组DNA为模板,通过聚合酶链反应。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
采用根癌农介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP基因在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新基因的亚细胞定位和瞬时表达奠定了基础.
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;8的农液中15min,共培养3d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
重金属转运蛋白P-type ATPase(HMA)已被证实参与植物体内的重金属运输,HMA5主要参与铜的转运。在模式植物拟南芥、水稻和黄瓜中对HMA5基因进行了较多的研究,但是对豆科植物HMA5的研究鲜见报道。实验室前期在天蓝苜蓿中分离到一个与铜胁迫及共生结瘤相关的HMA5基因,为了对此类基因在豆科植物共生结瘤中的作用进行深入研究,本研究对全基因组已测序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因组进行筛查,寻找HMA5同源基因并通过表达模式分析初步判断其与共生结瘤的关系,在此基础上,以其中的MTR_8g079250基因为对象,进行亚细胞定位、组织表达、RNA干扰和过量表达等研究,初步鉴定该基因在共生结瘤中的功能。1、MTR_8g079250的亚细胞定位构建MTR_8g079250的洋葱表皮亚细胞定位载体,通过基因枪轰击转化洋葱表皮细胞,在激光共聚焦显微镜下观察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在细胞膜上表达,在细胞核上也有微量的表达;构建MTR_8g079250的叶片亚细胞定位载体,通过根癌农介导注射叶片的方式进行转化,结果表明目的基因主要定位在细胞膜和细胞核上;3构建绿色荧光蛋白融合表达载体,利用根癌农法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达。2、MTR_8g079250的组织表达构建PMTR_8g079250::GUS融合表达载体,通过农发根转化的方式转入蒺藜苜蓿根部,经培养后,进行GUS染色观察。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;为了克服植物修复技术中超富集植物生长缓慢和可收获的生物量小等的限制,将外源基因在植物。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
了红树植物‘白骨壤’中甜菜碱/脯氨酸转运蛋白基因(BetlProT2),采用根瘤农介导的方法,将携带有GFP报告基因的35S—Bet/ProT2-GFP融合质粒转化洋葱表皮细胞,亚细胞定位分析表明,Bet/ProT2是定位在细胞质膜上的跨膜蛋白。进一步利用农介导法将Bet/ProT2转人粳稻‘日本晴’,鉴定结果表明,BetlProT2基因已经整合到‘日本晴’的基因组中并有效表达。转Bet/ProT2基因水稻的耐盐性明显提高,在甜菜碱和脯氨酸同时或分别存在的条件下,转基因水稻可以在含有150mmol·L^-1NaCl的液体培养基中正常生长,同时叶片中H2O2含量较低;泛素-蛋白酶体通路在植物防卫反应(包括反应)中发挥重要作用,泛素连接酶(ubiquitinligase,E3)则是参与这一过程的重要组分。而野1生型水稻在相同处理条件下出现明显枯萎,叶片中H2O2大量积累。结论:红树Bet/ProT2基因能通过吸收甜菜碱和/或脯氨酸来降低氧化伤害,显著提高转基因水稻的耐盐能力。
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