间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
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间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。8． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。9． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。11． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。12． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
本试剂盒用于体外定量检测、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中兔骨碱性磷酸酶（BALP）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
实验原理试剂盒采用双一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被兔骨碱性磷酸酶（BALP）捕获的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔骨碱性磷酸酶（BALP）呈正相关。用在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
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