无细胞系统是利用细胞提取物（而不是细胞）进行基因转录和翻译的系统。一个无细胞基因表达系统主要包括三个部分：细胞提取物，反应混合液，以及核酸模板
1.细胞提取物：从细胞中提取的物质，主要包含核糖体、RNA聚合酶、其他转录和翻译蛋白（比如σ因子、起始因子和延伸因子），以及用于能量代谢的酶和辅因子。在有些菌株的提取物中，可能抑制了蛋白酶和核酸酶的活性。
2.反应混合液
胰蛋白酶
无细胞系统是利用细胞提取物（而不是细胞）进行基因转录和翻译的系统。一个无细胞基因表达系统主要包括三个部分：细胞提取物，反应混合液，以及核酸模板
1.细胞提取物：从细胞中提取的物质，主要包含核糖体、RNA聚合酶、其他转录和翻译蛋白（比如σ因子、起始因子和延伸因子），以及用于能量代谢的酶和辅因子。在有些菌株的提取物中，可能抑制了蛋白酶和核酸酶的活性。
2.反应混合液：包含蛋白质合成所需的一些原料，如氨基酸、核苷酸、盐离子（如铵盐、镁、钾）、能源（糖类、磷酸肌酸等）、拥挤试剂（crowding agents）、代谢辅因子（辅酶A、NAD）、缓冲液、tRNA以及其他代谢添加剂等。
3.核酸模板：可以是质粒DNA或PCR产物线装DNA，浓度通常在1-20 nM。
无细胞系统一般的反应体积为10微升，但是根据其实际应用，反应体系可以从10^(-15)到10^3变化。在开始反应时，将三种组分在16-37℃下孵育，蛋白质合成将在1-24h内进行。
蛋白质含量测定方法之双缩脲法（biuret法）
实验原理双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要，但并不需要十分准确的蛋白质测定。
胰蛋白酶与胰酶的区别
胰酶与胰蛋白酶的是同一种物质吗？相信很多人并不能分清两者的区别。胰酶顾名思义是由动物胰脏中提取的多种酶组成的混合物酶制剂，主要为胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶，其主要成分为胰蛋白酶。要想更深入的了解两者的关系，我们先从人体内zui重要的器1官胰脏说起。
胰1腺分泌出的胰液含有胰蛋白蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶，主要成分为胰蛋白酶，属肽链内切酶。胰脏是我们身体上一个非常不显眼的小器1官——胰脏，胰脏有两部分，一是胰1腺，是外分泌腺，产生胰液；二是胰岛，是内分1泌腺，产生胰岛素，胰1腺分泌出的胰液经胰管输入到十二指肠，胰液含有胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶等多种物质，可作用于肠道分解蛋白质、脂肪和糖的作用。
胰蛋白酶是由胰1腺分泌的一种蛋白水解酶，在动物中作为消化酶而起作用，主要作用于精氨酸或赖氨酸羧基端的肽键，蛋白质分解为氨基酸、氨基酸多肽等，再被人体肠道吸收到人体各组织中去，所以胰蛋白酶在食物消化中起到至关重要的作用。
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