污染途径 污染物,特别是微生物常通过下列途径进入培养体系,造成污染
1、空气:空气是微生物及尘埃颗粒传播的主要途径。空气流动性大,如果培养操作场地于外界隔离不严格或消毒不充分,外界不洁空气很容易进入造成污染。因此,培养设施不能设在通风场所。无菌操作应在净化台内进行,工作时要带口罩,以免因讲话、咳嗽等使外界污染进入操作面,造成污染。
2、器材:各种培养器皿、器械消毒不和洗刷不干净
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污染途径 污染物,特别是微生物常通过下列途径进入培养体系,造成污染
1、空气:空气是微生物及尘埃颗粒传播的主要途径。空气流动性大,如果培养操作场地于外界隔离不严格或消毒不充分,外界不洁空气很容易进入造成污染。因此,培养设施不能设在通风场所。无菌操作应在净化台内进行,工作时要带口罩,以免因讲话、咳嗽等使外界污染进入操作面,造成污染。
2、器材:各种培养器皿、器械消毒不和洗刷不干净导致污染,另外需要对培养箱进行定期消毒,防止形成污染
3、操作:实验操作无菌观念不强,技术不熟练,使用污染的器皿或封瓶不严等,都可以造成污染。培养两种细胞以上时,操作不规范,交叉使用吸管或培养液、瓶等有可能导致细胞交叉污染。
4、血1清:有些血1清在生产时就已经被支原体或病毒等污染,变成了污染。
5、组织样本:原代培养的污染多数来源于组织样本;取材时碘酒消毒后脱碘不,可造成碘混入组织,细胞或培养液中,影响细胞细胞生长。
细胞培养的目的究竟是什么?
1.1 研究开发,如新药筛选,疫1苗、基因工程、细胞工程研究与开发、单抗1体制备等。
1.2 基础研究,如作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。
2 生物制药,疫1苗生产:如病毒性疫1苗(肝2炎病毒疫1苗、艾1滋病疫1苗等),多肽疫1苗(肿1瘤疫1苗)等。
2.2 基因工程生产:如EPO等。
2.3 抗1体、基因治1疗生产。
2.4 细胞工程生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
2.5 利用细胞法体外测定生物活性物质的活性;并预测其在体内的和替代体内法检测其成品的生物活性。
细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。还有细胞培养的温度,和合适的气体环境。细胞操作主要是无菌,一旦被什么都做不了。
⑴超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类;
⑵无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等;
⑶操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物 ;
⑷洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等.;
⑸分析间:显微镜,计算机及打印机等。
硬件是实验成功的基础,细胞培养的设备及环境,十分重要!
RCCS-3D系统中细胞的分化及3D结构
不同表型的异种细胞(正常细胞和肿X瘤细胞)混合培养可促进&> 构造的器X官类型分化,特别是肿X瘤细胞和正常基质细胞在RCCS-3D中导致分化的肿X瘤块形成。例如,当前X列X腺X细胞与正常的骨基质细胞混合培养时,肿X瘤细胞表型和基因型的转变,细胞生长和前X列X腺素特异性抗原产物增加。前列X腺XX细胞可侵袭前X列X腺组织外植块,并保持血管等结构的完整。
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