RCCS-3D系统中细胞的生长优势?
生长其中的细胞或组织是以自由落体的状态悬浮,没有搅拌器、气泡等破坏性压力,故组织在培养液中得以自由降落、翻转并与培养液充分混合,其容器内各方向的力量达到平衡,所以细胞/ 组织不会受到单一方向的力量影响,可朝任意方向均匀生长,是市面上唯1一可使细胞自由生长分化,增加细胞增殖速率,减少细胞和有效增加细胞产物分泌的系统。
RCCS
三维细胞培养支架
RCCS-3D系统中细胞的生长优势?
生长其中的细胞或组织是以自由落体的状态悬浮,没有搅拌器、气泡等破坏性压力,故组织在培养液中得以自由降落、翻转并与培养液充分混合,其容器内各方向的力量达到平衡,所以细胞/ 组织不会受到单一方向的力量影响,可朝任意方向均匀生长,是市面上唯1一可使细胞自由生长分化,增加细胞增殖速率,减少细胞和有效增加细胞产物分泌的系统。
RCCS特点
1 允许在一个三维空间的球体内共培养多种细胞
2 容器(存储营养液及细胞)在旋转时仅有较小的剪切力,因此导致的湍流非常小,便于细胞增殖
3 具有高营养素传质特点,可预防细胞
4 容器转速可通过转速表进行任意调整
培养容器应该以什么速度旋转?
这取决于细胞聚合体的直径。当容器转动时,细胞聚合体加速,直到他们到达沉积速度,而该速度取决于细胞聚合体的大小。根据斯托克斯方程,沉降速率随着细胞聚合体半径的平方而增加。因此,随着聚合体体积上的增加,它们沉降的更迅速,同时为了防止细胞聚合体与培养壁的碰撞有必要增加旋转速度。因此,一开始可能以慢速旋转培养,例如7rpm,当细胞聚合体在体积上增长并且变得可见,再增加旋转的速度。
RCCS转壁式生物反应器在细胞增值技术中的应用!
细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然,细胞活力检测法并不能终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序,但的干扰可抑制凋亡的发生;这时若采用细胞活力检测法,显然可以区分两种条件下的细胞数量,但我们并不能从干扰组细胞数大于对照组的事实说明可促进细胞增殖的结论。所以直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克X隆形成。
原代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大,是检测很好的实验对象,永生化细胞株也是从原代1开始的,但导入了病毒增殖基因等,跟原代是不同的,而且“50代(大概的)以前的细胞和之后的细胞比较,之后的遗传物质已经改变,并不再具有接触生长抑制现象。这些细胞带有ai变细胞的特点“。在养原代细胞和永生性细胞株的过程中发现,永生细胞株形态及整理状态不如原代,但可以相对长时间传代,而原代有代数限制,这是永生细胞株的一大优势。原代细胞具有着可持续传代;生物性状发生变化;仍保留亲体组织的遗传特征;接近和反映体内生理特征等优势。
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