武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士创办。这张亚细胞水平的人类蛋白质组空间分布将大大增加我们对人类生物学和疾病的理解。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向提供的生物技术服务。
亚细胞定位技术服务实验流程：
植物亚细胞定位技术服务
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士创办。这张亚细胞水平的人类蛋白质组空间分布将大大增加我们对人类生物学和疾病的理解。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向提供的生物技术服务。
亚细胞定位技术服务实验流程：
构建载体——测序验证成功后转大肠——扩增大肠——获得大量载体——PCR——构建表达载体——转化农、注射/转化拟南芥/原生质体——取样品共聚焦观察。
亚细胞定技术位服务实验注意点：
1、有共定位要求的蛋白，客户提供蛋白定位预测结果，我们选择相应的marker载体进行共定位。如果观察结果和预测不一致，则应该是蛋白原因而不是观察原因。如果需要二次观察则另外收取样品观察费用。
2、实验结果：提供清晰的荧光图，明场图，merge图。
3、交付数据：数据图、质粒测序结果、质粒及大肠。
4、提供拟南芥、水稻、等原生质体。
5、Marker种类：线粒体、叶绿体、细胞核定位、细胞膜定位、内质网
6、可以在实验后保留瞬时转染的叶片供后续检测。
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士创办。1）将融合基因（待测植物蛋白质基因-报告基因）到植物表达载体，得到重组表达载体。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向提供生物技术服务。
基本途径 糖酵解在胞液中进行，其途径可分为两个阶段。阶段从葡萄糖生成2个磷酸丙糖。第二阶段由磷酸丙糖转变成酸，是生成ATP的阶段。
阶段包括4个反应： （1）葡萄糖被磷酸化成为6-磷酸葡萄糖。此反应由己糖激酶或葡萄糖激酶催化，消耗1分子ATP； （2）6-磷酸葡萄糖转变成6-磷酸果糖； （3）6-磷酸果糖转变为1，6-二磷酸果糖。此反应由6-磷酸果糖激酶-1催化，消耗1分子ATP； （4）1，6-二磷酸果糖分裂成二个磷酸丙糖。 第二阶段由磷酸丙糖通过多步反应生成酸。由糖酵解途径的中间产物可转变成甘油，以合成脂肪，反之由脂肪分解而来的甘油也可进入糖酵解途径氧化。在此阶段每分子磷酸丙糖可生成1分子NADH+H+和2分子ATP，ATP由底物水平磷酸化产生。
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士创办。蛋白组数据及基于的荧光成像技术，为人类细胞的亚细胞结构定位提供了目前为止为的综合性数据。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向提供生物技术服务。
蛋白分布在细胞中的各个位置，其中蛋白丰度高，种类丰富的研究比较深入。定位注释结果准确的区域有细胞核，原生质体，线粒体，内质网等，植物还有叶绿体和液泡。GaMYB2在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析：采用基因枪轰击的方法，用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击，暗培养过夜后，在激光共聚焦显微镜下进行观察，从图A中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光，为组成型表达。而对于定位在细胞膜，分泌蛋白或者定位在多个区域的蛋白来说，其亚细胞定位预测信息一般准确性较低。
亚细胞定位实验本质上，既然是荧光双染技术，蛋白质本身没有荧光，有多种办法使它带上荧光信号，一是GFP（绿色荧光蛋白）融合标记，二是免1疫荧光标记，通过带有荧光的抗1体直接或者间接识别蛋白。标记完成后在激光共聚焦显微镜下观察荧光信号的叠加情况，如果能与细胞器等Marker蛋白信号重叠则可说明目的蛋白定位情况。武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。很多情况下用GFP（绿色荧光蛋白）融合标记目的蛋白，用荧光抗1体标记细胞器。
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