蛋白质结晶涉及四个重要步骤
1. 蛋白质纯度的确定。如果不够非常纯,必须要进一步纯化。
2. 蛋白质溶解于合适的溶剂中,从中它能通过一种盐或有机化合物而析出。溶剂通常是水-缓冲剂溶液,有时加,如2--2,4-(MPD)。正常情况下,沉淀剂也被加入,但是浓度不高于使沉淀产生。对于不溶于水-缓冲剂或水-的膜蛋白,还需要加入去污剂。
3. 使溶液过饱和。在这一步中,小聚集体形成
蛋白质晶体板公司
蛋白质结晶涉及四个重要步骤
1.蛋白质纯度的确定。如果不够非常纯,必须要进一步纯化。
2.蛋白质溶解于合适的溶剂中,从中它能通过一种盐或有机化合物而析出。溶剂通常是水-缓冲剂溶液,有时加,如2--2,4-(MPD)。正常情况下,沉淀剂也被加入,但是浓度不高于使沉淀产生。对于不溶于水-缓冲剂或水-的膜蛋白,还需要加入去污剂。
3. 使溶液过饱和。在这一步中,小聚集体形成,它是晶体生长所需的核。对小分子的结晶来说,相比于蛋白质更为人熟知,晶核的自发形成需要提供表面张力能。一旦这个能障被突破了,晶体开始生长。能障在高水平的过饱和度时很容易克服。因此,在高过饱和度时,晶核更易自发形成。晶核的形成可作为一个过饱和度和其他参数的函数通过多种方法来研究,包括光散射、荧光去极化及电子显微镜。
4.一旦晶核形成,晶体生长正式开始。对低分子量的化合物而言,新分子会逐步结合到正在生长的晶体表面。这是由于这些位置的结合能比较大,相对于分子结合到平滑的表面。这些步骤要么由晶系缺陷造成,要么发生在表面随机形成的晶核。
蛋白结晶板
但主要是嗜热菌蛋白酶的结晶条件数显著减少,其他4种蛋白在两种方法上均有相近的结晶条件数,表明微流控芯片能以接近24孔结晶板的效率进行蛋白质结晶筛选.但是,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有60%的结晶条件不同,20℃时有90%的结晶条件不同,这表明目前的这种微流控芯片还不能直接代替传统的24孔结晶板,它可以作为蛋白质结晶筛选时的一种补充方式。
技术成为目前迅速发展的前沿领域之一,是化学科学和生命科学分析研究的重要技术平台.微流控技术高通量,低消耗和低成本的特点使其在蛋白质结晶条件筛选和优化方面展示了良好的应用前景.本文对应用于蛋白质结晶的各种微流控芯片技术的原理和方法进行了综述,并对目前几种商业化和文献报道的典型蛋白质结晶微流控系统进行了介绍和比较.
蛋白结晶板技术
提出来的一项新型的分析技术,是当前分析科学活跃的发展领域之一,代表了新世纪分析仪器的发展方向。微流控芯片的发展有赖于不断出现的微机电加工技术,微流控芯片的结构越来越复杂,功能也越来越多样化,由此,研究和探索简便的加工技术成为微流控技术发展的一个重要组成部分,本的研究工作将围绕着微流控蛋白质结晶芯片不同材料的性能与功能要求来进行相关加工技术的探讨。 蛋白质结晶微流控芯片是一种用于蛋白质结品条件高通量、筛选的新设备,对于结构生物学的发展具有重要意义,是目前研究的热点。本根据蛋白质结晶系统的要求,设计了具有双层结构的微流控芯片。
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