广州硕谱生物科技有限公司,SPE小柱,是目前国内生产SPE小柱较好的生产厂家。氨丙基SPE柱类型
固相萃取(Solid Phase Extraction,简称 SPE)是一种以液-固色谱分离为基础的前处理技术,可对目标化合物进行选择性吸附和选择性洗脱。按保留机理,力主要分为无极力作用、极力作用、离子交换(静电吸引)。
反相态是 SPE小柱中相对于流动相极性较低的分离
氨丙基SPE柱类型
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固相萃取(Solid Phase Extraction,简称 SPE)是一种以液-固色谱分离为基础的前处理技术,可对目标化合物进行选择性吸附和选择性洗脱。按保留机理,力主要分为无极力作用、极力作用、离子交换(静电吸引)。
反相态是 SPE小柱中相对于流动相极性较低的分离态。本发明主要利用固定相官能团的碳氢键和目标化合物的碳氢键之间的非极性作用力,适合从极性基质中提取分离非极性和中极性的目标物。
对由非极性力吸附到反相 SPE柱上的目标物,可用弱极性溶剂,如氯1仿、环己1烷、乙1酸乙1酯等洗脱。只有当溶剂的洗脱强度足够大时,才能使目标物与吸附剂之间的范德华力破坏,使目标物从 SPE柱洗脱。即使是极性更强的甲1醇,对许多化合物而言,也有足够的非极性力量来洗脱它。有时候,单种溶剂无法洗脱疏水性强的目标物,可以考虑使用二1氯甲1烷:乙1酸乙1酯(1:1,体积比)。
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正相填充(Silica,NH2, CN, Florisil, Diol, Carb,Alumina-N, A, B)
*分析物:中等极性至强极性
*基质:从非极性到中极性
·方法:
(a)激1活:非极性有机溶1剂(通常由上样液所在的有机溶1剂激1活)
(b)洗脱:非极性有机溶1剂(一般是上样液所在的有机溶1剂)
反相模式下,溶剂体系的极性应以样品溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂的次序递减,并以递增程度递减。要确保所选择的样本溶剂不会洗脱目标物,所选择的淋洗剂应在不洗脱目标物的前提下,很大限1度地洗脱干扰物,所选洗脱剂应能碰巧完全洗脱目标物。
正相位模式是 SPE小柱相的固定相极性大于流动相极性的分离模式。主要用途:
固相萃取材料极性表面与物极性官能团极性相互作用;极性力比非极性力强,但比离子力弱;常用的极性基团有羟基,胺基,巯基等。弱极化基质环境有利于形成极性力,因为弱极化溶剂不能与极性固定相形成氢键功能团。结果表明: SPE正相萃取后,样品基质多为弱极性,如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等,而目标物多含有极性官能团。
渠道效应
当 SPE小柱填料装实后,流速过小柱时,液体是以层流通过填料层,将填料层充分浸润,润湿的液面截层向上推进,见附图;流速过大时,柱床厚度过大,可能在填料内形成沟道,液流将穿过沟道,通过小柱,而使填料浸润不足,从而使得体与填料的接触面积大大减少,严重影响填料对目标物质的保留性。
溶液环境的 pH如何影响化合物在柱状物上的保持性,我们为什么要关注该化合物的 pKa值,这些因素需要放在C18柱状物上吗?
A:首先, Ka指酸度系数,也称为酸离解常数,可以被理解为酸离解H离子的能力,而 pKa=- lgKa,对于酸,在环境中 pH离子的平衡如下
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当发现回收率下降时,收集该组分,并检测目标化合物是否在这一阶段被洗脱。若经调整 pH使可离子化的目标化合物中性化,并通过疏水力被 SPE柱吸附,则洗涤时应注意保持 pH不变,以免因 pH变化而导致目标化合物在洗涤过程中丢失。
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正压法通常是将带一定压力的空气或氮气从 SPE柱上吹走填料中的水;负压法则是将一定真空度从萃柱下吹走残余的水。
单独样品处理,可使用一个通过适配器连接到 SPE柱,推动样品或溶剂通过 SPE柱管,如需500 mg或1 g的吸附剂柱床,可选用适配器直接与配合。自动 SPE作业,由于其优良的结果重复性,已被广泛使用;96孔板的 SPE装置也是一种理想的自动化方案。该方案适用于样品量大,需要处理的场合。
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