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做好日常仪器维护,养成习惯,可大大降低故障率,减少维修及停车费用。根据仪器的硬件结构,经过流动相的顺序分为:流动相溶剂瓶→在线脱气机→高压泵→自动/手动进样器→色谱柱温箱→检测器→废液。以下小探就仪器各部在日常使用中应注意的事项,均按此顺序讲。首先是溶剂瓶,大家似乎觉得溶剂瓶无
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做好日常仪器维护,养成习惯,可大大降低故障率,减少维修及停车费用。根据仪器的硬件结构,经过流动相的顺序分为:流动相溶剂瓶→在线脱气机→高压泵→自动/手动进样器→色谱柱温箱→检测器→废液。以下小探就仪器各部在日常使用中应注意的事项,均按此顺序讲。首先是溶剂瓶,大家似乎觉得溶剂瓶无非就是几个玻璃瓶,似乎没什么好说的。不过,这样看起来简单,如果不注意的话,常常会招来不少麻烦:1.1首先就是污染:要特别注意盛有水或缓冲液的瓶子,虽然液体中使用的水大多经过杀菌处理,但是,细菌的生命非常顽强,在适当的温度和光照下,它们就会活跃起来,如果流动相中再加入磷酸盐一类的添加剂,它们就会更加生机勃勃。因此,溶剂瓶要做的重要工作就是勤换流动相,常换常新。另一种防止细菌滋生的方法是在水中加入一定浓度的,但是,这种物质有,又有规律性,不能很好地得到,而且风险很高,所以,我认为,还是直接换一种流动相比较方便。
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1.2水相要经常更换,那么有机相呢?永远不要担心细菌繁殖吧?是的,有机相完全不用担心,但是如果是装的瓶子,要特别小心的“聚合”,在自然条件下,特别是各种光照条件下,分子就会和周围的朋友手拉手,小团体就会慢慢地“聚合”起来。为防止聚合的发生,要特别注意装应使用茶色的溶剂瓶,避免阳光直射,以及在更换时,一定把瓶底剩余的倒掉换新的。
圆柱:10-15 m常数下的简单样品的分析25-30 m标准柱长满足大多数应用50 m,60 m,100 m复杂样品分析直径:用0.53 mm大口径代替填充柱,可承受较大体积进样,痕量分析0.32 mm宽,分流/不分流进样,可承受较大体积进样0.25 mm窄径分流进样, GC/MS应用,柱效更高0.18毫米微径分离高柱效快0.10毫米 GC,对仪器分离要求高膜层厚度10 um薄膜,保留和柱容量低适用于高沸物、组分密集样品或热敏化合物0.25~0.50 um标准膜厚。1.0~10.0 um厚膜保持柱能力高适用于低沸点挥发性化合物厚膜有利于掩蔽活,高温下柱损失较大。
如60℃至240℃/260℃等色谱柱的温度范围分别表示什么?60℃—该温度使用柱效会降低的温度下限,但不会损伤色谱柱240℃—恒温上限,可在该温度下长期使用260℃—程序升温温度上限,不能超过该温度,并且该温度使用时间不得超过10分钟15.了解液相色谱柱的若干参数以及安捷伦色谱柱的分类和适用范围表面积-颗粒表面和内孔表面之和,以m2/gram表示;高表面积对多组份样品分离有很强的保持性,柱容量和分离程度;具有较低表面积的填料往往能迅速达到平衡,对梯度淋洗尤其重要直径-60-10,000个微粒孔或空腔的平均尺寸大孔内的填料颗粒能延长溶质大分子在填料表面停留的时间,达到充分分离,改善峰形;样品 MW≤4000,选择80°°的孔径;碳盖层-对色谱分离的影响,与基体物质相连接的键合相量。高碳率:更高的分辨率,更长的分析时间。
色谱柱如何冲洗?用于反相层析柱的冲洗:在下列溶剂中,每个色谱柱至少25 mL,清洗色谱柱无缓冲盐的流动相腈+25%异正己烷*如果使用己烷-冲洗色谱柱,则必须先用异冲洗色谱柱,然后再使用反相流相!!!用于正相色谱柱的冲洗:以50 mL以上的溶剂冲洗色谱柱(分析柱)。50%+50%醋酸。
气相色谱柱如何老化?装上色谱柱后,先将色谱柱加热至少3倍,再将载气流速调至正常流速,并从100度升温至老化温度升至老化温度。陈化温度——在样品分析终温20度以上,但未超过色谱柱恒温温度上限的状态下,通过恒温2小时的方法老化,新的毛细管色谱柱迅速老化,当色谱柱老化时,升温速度没有限制,可以用升温速率老化色谱柱。18.液相色谱仪的重要组成部分是什么?液体有什么检测器?脱气装置,泵,温度计,自动进样器,检测器。探测器有:VWD可变波长检测器、 DAD二极管阵列检测器、 MWD多波长检测器、 RID检测器、示差检测器、 FLD荧光检测器。溶剂进口过滤器如何选择?传统和毛细液相使用的溶剂过滤头有:20μ m玻璃过滤头(5041-2168)、 PTFE连接头(5062-8517)、不锈钢过滤头(5062-8517)、不锈钢过滤头(01018-60025)配制液相用的溶剂过滤头有:40μ m玻璃过滤头(3150-0944)和 PTFE接头头7 mm/4 mm (G1361-23204)如果流动相涉及下列溶剂,应避免使用不锈钢过滤头:碘化锂、、高浓度的及硫酸,有机酸溶液中的1%会腐蚀不锈钢、和异或 THF混合液等。每天用35%的浸泡玻璃滤芯一小时(不用超声波清洗,造成玻璃)。
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固相萃取柱填料:
固相萃取填料通常是色谱吸附剂,可以分为三大类:第i一类是以硅胶为基质(如C18、C8等);第二类是聚苯乙i烯-二乙烯苯等无机材料,如聚苯乙i烯-二乙烯苯等;另一类是以硅藻土、氧化铝、石墨化碳等为主要原料。
固相萃取柱容量:
柱的容量必须考虑到固相萃取柱的选择。因为我们所面对的样品基体往往比较复杂,如食物、生物样品等。固相萃取中,固相萃取吸附剂吸附目标化合物的同时,也吸附类似性质的杂质。所以在考虑柱容量时,应是总目标化合物加可吸附杂质含量不能超过柱容量。反之,可能会有部分目标化合物在载样过程中不能被吸附,导致回收率较低。
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