DNA新链的延伸由DNA聚合酶 III所催化。为了copy的不断进行，解旋酶须沿着模板前进, 边移动边解开双链。由于DNA的解链，在DNA双链区势必产生正超螺旋，在环状DNA中更为明显，当达到一定程度后就可能造成copy叉难以再继续前进，但在细胞内DNA的copy不会因出现拓扑学问题而停止，因为拓扑异构酶会解决这一问题。
随着引发体合成RNA引物，DNA聚合酶 III
分子伴侣表达系统
DNA新链的延伸由DNA聚合酶 III所催化。为了copy的不断进行，解旋酶须沿着模板前进, 边移动边解开双链。由于DNA的解链，在DNA双链区势必产生正超螺旋，在环状DNA中更为明显，当达到一定程度后就可能造成copy叉难以再继续前进，但在细胞内DNA的copy不会因出现拓扑学问题而停止，因为拓扑异构酶会解决这一问题。
随着引发体合成RNA引物，DNA聚合酶 III开始不断地将引物延伸，合成DNA。DNA聚合酶 III是一个多亚基复合二聚体，一个单体用于前导链的合成，另一个单体用于滞后链的合成，因此它可以在同一时间分别copyDNA前导链和滞后链。虽然DNA前导链和滞后链copy的方向不同，但如果滞后链模板环绕DNA聚合酶III,并通过DNA聚合酶 III,然后再折向未解链的双链DNA的方向，则滞后链的合成可以和前导链的合成在同一方向进行。
遗传控制中大的困难并不是DNA的，而是需要被的特异DNA段的分离 [2] 。如果以基因为目的，特异DNA段的分离将大大有助于获得与遗传信息同样多的相关的基因产物，一般说这些基因产物均为蛋白质多肽，因此抗该蛋白质的对于测定和沉淀蛋白质及其前体有重要用途，甚至可用于了解蛋白质分子量 [2] 。AMV反转录酶和MLV反转录酶都必须有引物来起始DNA的合成。cDNA合成的引物是与真核细胞mRNA分子3’端poly（A）结合的12～18个核苷酸长的oligo（dT）。
自身引导法 [3] 。合成的单链eDNA3’端能够形成一短的发夹结构，这就为第二链的合成提供了现成的引物。当链合成反应产物的DNA—RNA杂交链变性后利用大肠DNA聚合酶I Klenow片段或反转录酶合成eDNA第二链，用对单链特异性的S1核酸酶消化该环，即可进一步。但自身引导合成法较难控制反应，而且用S1核酸酶切割发夹结构时无一例外地将导致对应于mRNA5’端序列出现缺失和重排，因而该方法很少使用。
置换合成法。该方法利用链在反转录酶作用下产生的DNA RNA杂交链不用碱变性，而是在dNTP存在下。利用RNA酶H在杂交链的mRNA链上造成切口和缺口。从而产生一系列RNA引物，使之成为合成第二链的引物。在大肠DNA聚合酶工的作用下合成第二链。该反应有3个主要优点：①非常有效；②直接利用链反应产物，无须进一步处理和纯化；③不必使用S1核酸酶来切割双链cDNA中的单链发夹环。
（作者： 来源：）
