广州硕谱生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前国内生产SPE小柱较好的生产厂家。PRS固相萃取柱类型
相对于弱酸性化合物而言,弱碱性化合物在阳离子交换固相萃取过程中99%的分解都是阳离子,这一弱碱性化合物所处的环境系统的 pH值必须其 pKa至少两个 pH单位。洗脱时,环境体系的 pH值应高于化合物的 pKa值至少两个 pH单位,99%的化合物此时为中性状态,可通过适
PRS固相萃取柱类型
广州硕谱生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前国内生产SPE小柱较好的生产厂家。PRS固相萃取柱类型
相对于弱酸性化合物而言,弱碱性化合物在阳离子交换固相萃取过程中99%的分解都是阳离子,这一弱碱性化合物所处的环境系统的 pH值必须其 pKa至少两个 pH单位。洗脱时,环境体系的 pH值应高于化合物的 pKa值至少两个 pH单位,99%的化合物此时为中性状态,可通过适当的溶剂从阳离子交换柱中洗脱。
选择离子交换固相萃取柱的种类:为能有效地洗脱吸附在一起的离子化合物,对于含有强离子官能团的目标化合物,一般选用弱离子交换柱;对于含有弱离子官能团的化合物,一般选用强离子交换柱。该方法可避免目标化合物与吸附剂官能团同时处于离子化状态,使目标化合物始终保持在不能洗脱的保留状态。
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有时,强溶剂 B也不能除去色谱柱中残留的污染物。然后需要使用更强的溶剂或混合多种溶剂。若污染物不是生物质,一种强溶剂或多种溶剂的联合清洗基本上可以解决这个问题。圆柱制造商的网页和产品说明书中也有许多清洁方法的建议。各种清洁方法的模式通常相似,溶剂系列中使用的溶剂的强度逐步提高,zui后一种溶剂往往非常具有非极性(疏水性)(例如乙i酸乙i酯甚至是烷烃),以便于将脂质、油等非极性污染物溶解。每一种溶剂在一个溶剂系列中保证与另一溶剂互溶。在整个清洁过程结束后,在返回到原来的流动相系统之前,必须要通过一种强度适中、互溶性很好的溶剂过渡。举例来说,异丙i醇是一种很好的过渡溶剂,它可以与正己烷或二氯甲i烷以及水相中的溶剂互溶。但异丙i醇粘度很大,必须保证低流速,以免使泵压过高。
反相萃取分离主要是利用固相萃取材料官能团与目标化合物碳氢键之间的非极性作用力。反相非极性的 SPE柱通常更适合从极性基质中提取分离出非极性和中等极性的目标化合物。对利用非极性作用力吸附于非极性 SPE柱的目标化合物,可用氯i仿、环i己烷、乙i酸乙i酯等具有非极性的溶剂洗脱。当溶剂的洗脱强度足够大,可以使目标化合物与吸附剂非极性基团间的范德华力不受影响时,使其在 SPE柱中顺利洗脱。即使是极性更强的甲i醇,对许多化合物而言,也有足够的非极性力量来洗脱它。有时候,单种溶剂无法完全洗脱疏水性的目标化合物,可以考虑使用二氯甲i烷:乙i酸乙i酯(1:1,体积比)。
对典型的硅胶基质键合反相柱体,在不使用缓冲液的情况下,建议采用下列清洗溶剂系列:甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%异丙i醇---异丙i醇---二氯甲i烷---己烷;每种溶剂至少冲洗10个柱体,分析柱的洗涤流速为250 mm×4.6 mm。zui终以10柱体积异丙i醇过渡,然后返回到原始流动相(不含缓冲盐),zui后返回到初始流动相配置。如使用紫外检测器,则应避免选择在紫外区域有吸收作用的溶剂,否则需要使用大量的溶剂冲洗基线,以使基线稳定。四氢呋i喃也是常用的清洁溶剂。如怀疑柱子受到严重污染,也可用二甲亚砜(DMSO)或二甲i基胺与水按50:50的比例混合,用流速0.5 ml/min的水冲洗色谱柱。
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SPE小柱和色谱柱之间的一个区别是, SPE是一次性消耗品,在耐受溶剂范围之外,短时间的溶剂洗涤对小柱的保留特性几乎没有影响,而且不会造成保留的显著差异,因此它使用的 pH值范围较宽,一般可在pH值范围1-10之间使用,而不会造成结果的差异。
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固相萃取(Solid Phase Extraction,简称 SPE)是一种将选择性保留、选择性洗脱等过程结合在一起的分离技术。
在通过吸附剂(Sorbent)处理复杂样品时,吸附剂通过极性作用、疏水作用或离子交换等作用力,选择性地保留了目标物质(Aimed Compound)和少量与目标物质性质相似的组分,而其它组分则通过吸附剂流出小柱,然后以另一种溶剂体系选择性地洗脱目标物质,实现了目标物质的分离、提纯和富集。
固相萃取过程中,“保留”和“洗脱”都受到目标物、吸附剂和溶剂三个因素的影响,对于给定的目标物,选择合适的吸附剂、样品溶剂和洗脱溶剂是成功分离的关键。
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