武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。亚细胞定位是一种生物信息学上的概念,一般不是学生物的很少接触到这一类的东西,甚至连听都没有听说过,就算是学习生物化学的,也不一定会接触亚细胞定位这方面。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势
亚细胞定位服务技术
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。亚细胞定位是一种生物信息学上的概念,一般不是学生物的很少接触到这一类的东西,甚至连听都没有听说过,就算是学习生物化学的,也不一定会接触亚细胞定位这方面。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向提供的生物技术服务。
GaMYB2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因枪轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共聚焦显微镜下进行观察,从图A 中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图B 中发现GaMYB2-GFP 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。比如:targetP、SubLoc、WoLFPSORT等……。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向提供的生物技术服务。
细胞爬片可以买专门的爬片(一般直径14mm的小圆玻片正好适合24孔板的大小),在超净台中取出后用75%酒精浸泡5-10分钟,用镊子夹取后在酒精灯上过火后轻轻放入细胞板内(放前可事先在孔内滴一滴生长液以避免玻片与细胞板之间出现气泡)。3.生理意义糖酵解的生理意义在于迅速提供能量尤其对肌肉收缩更为重要。此后再接入适量消化好的细胞。
亚细胞定位是指某种蛋白或某个基因表达产物在细胞内的具体存在部位,如在胞核,胞浆内,细胞膜或某一特定细胞器上存在。蛋白分布在不同细胞的不同部位,对蛋白的亚细胞定位分析有助于蛋白功能研究的初步判断。
亚细胞定位基本技术路线:
提供序列信息或质粒或菌株——亚细胞定位预测软件分析——植物过表达载体构建——转化农杆1菌——农杆1菌介导法浸染烟1草或者水稻——亚细胞定位——激光共聚焦扫描
原理:构建编码目bai标蛋白和荧光蛋du白的融合蛋白的载体,转染细胞,表zhi达,然后激光共聚焦显微镜dao观察荧光信号所在位置,即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意做空载荧光蛋白的对照。
具体步骤:构建目标蛋白与GFP的融合蛋白的瞬时表达载体,基因枪轰击洋葱内表皮细胞,或化学(PEG)转化原生质体,瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置,当然激光共聚焦图片会更漂亮。
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