细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。以融合蛋白Annexin Ⅴ-EGFP作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发
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细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。以融合蛋白Annexin Ⅴ-EGFP作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
就是具有自动清洗程序的全自动生化分析仪也有交叉污染,例如Beckman 全自动生化分析仪CX4,它的试剂针(probe)、样品吸样针及反应搅拌棒是利用高压冲洗洗液冲洗,然后用高压压缩空气吹干,有时由于洗液压力和压缩空气压力偏低,使试剂吸针、样品针及反应搅拌棒冲洗不干净、吹不干,从而导致反应池之间相互污染、试剂间交叉污染,是检验结果偏离。另一个值得注意的问题是许多生化仪器由于长期频繁的利用,使加样针和试剂针的磨损加重或的“特氟龙”吸头不及时更换,使吸样针或试剂针密封层增大,产生泄露现象也是造成样本间及实际间项目污染的一个重要原因。
试剂吸样和样品吸样不准确,通常导致利用速率法测试的标本系统偏低或偏高。众所周知,速率法计算因子是由加样体积和试剂体积参与确定的,如果加样体积或加试剂体积不准,导致真正速率法计算因子和理论计算因子偏离,从而使测试结果不准确。
解决办法:a、定期进行一期维护和保养;b、按要求及时更换零部件;c;定期对仪器进行校准;d;全自动生化分析标本和试剂用量少,残存少量即会影响测试结果,每天应用无水乙醇擦洗并定期更换干燥棒,保证比色杯清洗后不留贱液,避免比色杯的交叉污染。
现代化分析仪上通常有分析程序供用户设定,包括样品量、试剂量、波长、分析方式和延迟时间、测试时间的设定等。下面我们就延迟时间和加样程序的设定来说明正确使用分析参数对于正确运用试剂的作用,比如肌酐测定法,我们在设定延迟时间应注意到在碱性条件下50秒前首先与乙酰等反应物质产生红色化合物,而在120秒后碱性又能与慢反应物质产生阳性干扰,解决办法:好设定延迟时间为50-60秒之间。
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