PEG法
其基本原理是在二价阳离子(Mg2+、Ca2+等)存在的情况下,PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀,从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。
1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶(DHFR)突变基因(氨甲1喋呤抗性)的质粒共培养,此基因插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤组织,在不含激
逆转录病毒包装
PEG法
其基本原理是在二价阳离子(Mg2+、Ca2+等)存在的情况下,PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀,从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。
1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶(DHFR)突变基因(氨甲1喋呤抗性)的质粒共培养,此基因插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤组织,在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源基因导入到了HE89的原生质体中,建立了植株再生的转化体系。
PEG法虽然转化效率较高,但必须以裸1露的原生质体为受体,而且还受到基因型的限制。
腺病毒载体应用优势
腺病毒载体转0基因效率较高,体外实验通常接近的转导效率;可转导不同类型的人组织细胞,不受靶1细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达(10E+11)/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达,安全性高。因而,腺病毒载体在基因治1疗临床试验方面有了越来越多的应用,成为继逆转录病毒载体之后广泛应用且非常具前景的病毒载体。
腺病毒防治原则
腺病毒的甲醛灭活疫1苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫1苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用,人们对全病毒疫1苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜1炎爆发的危险性降至zui小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控制流行性结膜1炎的发生。对腺病毒感1染的cure仍无有效medicine。
在格雷戈尔·孟德尔之前,人们曾认为遗传是一个混合过程,但是孟德尔证实存在一种不可分割和独立的遗传单位,后来人们证实这种遗传单位就是存在于染色体上的基因——一段DNA序列。孟德尔在基因水平上揭示了有性生殖的遗传过程(称之为“分离定律”与“自由组合”定律),虽然他那时并不知道基因的真实存在形式 [1] 。注意基因和DNA是完全不同的概念。

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