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做好日常仪器维护,养成习惯,可大大降低故障率,减少维修及停车费用。根据仪器的硬件结构,经过流动相的顺序分为:流动相溶剂瓶→在线脱气机→高压泵→自动/手动进样器→色谱柱温箱→检测器→废液。以下小探就仪器各部在日常使用中应注意的事项,均按此顺序讲。首先是溶剂瓶,大家似乎觉得溶剂瓶无非就是几个玻璃瓶,似乎没什么好说的。不过,这样看起来简单,如果不注意的话,常常会招来不少麻烦:1.1首先就是污染:要特别注意盛有水或缓冲液的瓶子,虽然液体中使用的水大多经过杀菌处理,但是,细菌的生命非常顽强,在适当的温度和光照下,它们就会活跃起来,如果流动相中再加入磷酸盐一类的添加剂,它们就会更加生机勃勃。因此,溶剂瓶要做的重要工作就是勤换流动相,常换常新。另一种防止细菌滋生的方法是在水中加入一定浓度的,但是,这种物质有,又有规律性,不能很好地得到,而且风险很高,所以,我认为,还是直接换一种流动相比较方便。
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1.2水相要经常更换,那么有机相呢?永远不要担心细菌繁殖吧?是的,有机相完全不用担心,但是如果是装的瓶子,要特别小心的“聚合”,在自然条件下,特别是各种光照条件下,分子就会和周围的朋友手拉手,小团体就会慢慢地“聚合”起来。为防止聚合的发生,要特别注意装应使用茶色的溶剂瓶,避免阳光直射,以及在更换时,一定把瓶底剩余的倒掉换新的。
色谱柱的使用与维护色谱柱的正确使用与维护非常重要,一不小心就会降低柱效,缩短使用寿命,甚至损坏。为了维护色谱柱,在进行色谱分析时,必须注意以下问题。调整流量过快…防止压力、温度急剧变化和机械振动。气温骤降或使色谱柱从高处落下,都会影响柱内填充状态;柱压突然升高或降低,也会对柱内填充物产生冲力,所以在调节流速时要缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前面所述)。反向色谱柱…一般情况下,色谱柱不能反冲,只有生产者指示柱可以反冲时,才能反冲去除留在柱头的杂质。反之,反向将迅速降低柱效。前柱与保护柱…为了避免破坏固定相,应选择适当的流动相(特别是 pH)。有时候,一预柱可以在进样器前连接,分析柱是硅胶粘合时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱前先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质溶解。不要把复杂的样品,特别是生物样品直接注入到柱中,需要对样品进行预处理,或者在进样器与色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般为填充具有相似固定相的短柱。可以也应该经常更换保护柱。
如何排除小概率故障?【1】泵压跳动,跳动范围约10 bar。对策:原来的小白头有点脏,换了之后还没有解决;2、将主动阀上的阀芯取出后,发现类似气泡存在,在超声5分钟内浸入-水溶液中试着除去气泡,重新安装后观察,仍未解决;更换新阀芯,安装完毕后,再也没有跳动,观察一段时间后比较平稳,顺利解决。
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自80年代中期以来,固相萃取(SPE)就已经发展成为一种样品预处理技术。液固萃取技术与液相色谱技术的结合发展起来。适用于样品的分离、提纯、浓缩。旨在减少样品的基体干扰,提高检测灵敏度。
SPE技术以液-固相色谱理论为基础,(化妆品用固相萃取),样品经选择性吸附、选择性洗脱后,是一种包含液相和固相的物理萃取过程,也可近似地看作一个简单的色谱过程。
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SPE是利用选择性吸附和选择性洗脱的液相色谱分离原理。比较常用的方法是将所测物质通过该吸附剂,保留所测物质,再选用合适的强度溶剂冲去杂质,然后用少量的溶剂迅速洗脱测物质,达到分离、净化和浓缩的目的。还可选择性吸附干扰杂质,而让被测物质流出;或同时吸附杂质和被测物质,再用适当的溶剂选择性洗脱被测物质。
固相萃取(化妆品用固相萃取)的萃取剂是固体,其工作原理基于:水样中欲测组分和干扰共存干扰组分在固相萃取剂上的不同作用,使它们彼此分离。固体萃取剂是一种以C18或C8、腈基、氨基等为基质的特殊填料。
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