基因枪法的优点是无宿主限制，受体类型广泛，操作迅速、简单，能有效地转化质体。由于取材广泛，金属微粒的喷射面广，转化频率高，所以具有广泛的应用前景。缺点是转化的DNA部分片段太大时DNA部分片段容易断裂，基因枪转化过程中，同源序列可通过DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA的相互作用，导致转录或转录后水平的基因沉默。另外，外源DNA往往成簇地整合到受体基因组中，而且可能以
腺病毒相关载体
基因枪法的优点是无宿主限制，受体类型广泛，操作迅速、简单，能有效地转化质体。由于取材广泛，金属微粒的喷射面广，转化频率高，所以具有广泛的应用前景。缺点是转化的DNA部分片段太大时DNA部分片段容易断裂，基因枪转化过程中，同源序列可通过DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA的相互作用，导致转录或转录后水平的基因沉默。另外，外源DNA往往成簇地整合到受体基因组中，而且可能以多种方式发生重排，所以转化体中的外源基因常常是多拷贝的。但对于这些不足，目前已有研究者在研究其机理并寻求解决办法。
真核细胞同源重组法
1994 年，Graham F建立了在293细胞同源重组产生重组腺病毒的方法。这个方法需要2个质粒：骨架质粒含有腺病毒绝大部分基因组序列，但不含有包装信号；穿梭质粒含有ITR、包装信号和目的基因克1隆位点，以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的基因克1隆到穿梭质粒，与骨架质粒共转染293细胞，由于这两个质粒的部分序列有重叠，能够在细胞内发生同源重组，zui终产生完整的载体基因组，并包装出重组病毒颗粒。该方法曾经被广泛使用，推动了腺病毒载体的发展。由于细胞内重组效率低，某些重组事件还可能产生可copy病毒(RCV)，必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组病毒，费时费力，正逐渐被其他方法替代。
腺病毒的结构
腺病毒含13%DNA和87%的蛋白质，病毒体分子量约为175×106。病毒基因组为线状双链DNA，大约含35kb～36kb，腺病毒12、18和31型的DNA组成中，G+C mol%zui低（48%～49%），属于对动物具有高致癌性基因型。腺病毒1、2、4、5、8等型的G+C mol%较高（61%），致癌性反而低或无。这是一种用于人腺病毒分离株的分组的标准，根据其基因同源性将人腺病毒分为A～F等6组。
腺病毒的分类
分类及自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来，已陆续发现了100余个血1清型，其中人腺病毒有52种，分为A、B、C、D、E和F六个亚群（subgroup）。基因cure常用的人的2型及5型腺病毒在血1清学分类上均属C亚群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强，滴度通常可以达到109pfu (plaque forming unit)/ml，其在单个细胞中的基因组拷贝数可达104（约占细胞总DNA的10%）。病毒颗粒比较稳定，通过CsCl梯度离心可以达到1010~1011pfu/ml，满足动物实验的要求。
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