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液相色谱法概述
液相色谱法自20世纪60年代问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、和高灵敏度的分离测定。液相色谱由于吸取了经典液相色谱的研制经验,并引入微处理机技术,极大的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的液相色谱仪,其自动化程度很高,既能控
昭和GPC柱价格
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视频作者:北京慧德易科技有限责任公司
液相色谱法概述
液相色谱法自20世纪60年代问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、和高灵敏度的分离测定。液相色谱由于吸取了经典液相色谱的研制经验,并引入微处理机技术,极大的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的液相色谱仪,其自动化程度很高,既能控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等),又能对获得的色谱图进行收缩、放大、叠加,以及对保留数据和峰高、峰面积进行处理等,为色谱分析工作者提供了、功能的分析工具。
液相色谱仪常见故障解决方案
如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障?
流动相内产生都无法清除不断产生的气泡,主要是因为过滤器长期沉浸于铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯冲洗半小时即可。
为什么液相色谱适合分析低沸点化学物质?
这个说法不能理解成液相色谱不适合分析高沸点物质。
其实这是因为气相色谱一般需要对物质进行加热,然后根据汽化温度(沸点)不同,物质先后进入检测器。检测器一般是氢火焰检测器为主。
如果一个物质沸点太低,那么很容易出峰非常快,和溶剂出在一起,在谱图前端,根本看不出来(如果你看过气相色谱图你就知道了)。
此时就需要用HPLC,因为HPLC分开物质依据的是物质和色谱柱填料的亲和力强弱,而不是沸点。
举个例子,如果我想要知道我一个样本中是否含有(沸点85℃),用气相色谱是非常困难的。因为沸点100℃以下的物质在GC里面出峰是极度困难的。
但是我如果用HPLC配合反相柱,此时就可以看得出来。
多说一点,实际上还有一些情况我不能用HPLC来分析,就是当一个化合物极性非常大或者极性非常小,此时我无论用正相色谱柱还是反相色谱柱,都会有一个问题,就是我的化合物要么出在前面和溶剂在一起,要么根本出不出来。
比如咪唑,咪唑的亲水性太强,我经常在HPLC反相柱里面分离不开,此时一般我要分析,就会借助GC(沸点256℃)
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