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纳微 Protein A亲和层析介质
今天,国内企业普遍认识到我们应当以技术和产业化发展来针对国外垄断的众多关键技术领域进行突围,把高科技自主可控的主动权和企业命脉牢牢掌握在自己手里,才能一劳永逸地解决“卡脖子”的问题。十多年如一日的科研攻关自主,终成就了自身在纳米微球制造方面的隐形冠FFFFFF;">i军
东曹TOYOPEARL纯化填料价格
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视频作者:北京慧德易科技有限责任公司
纳微 Protein A亲和层析介质
今天,国内企业普遍认识到我们应当以技术和产业化发展来针对国外垄断的众多关键技术领域进行突围,把高科技自主可控的主动权和企业命脉牢牢掌握在自己手里,才能一劳永逸地解决“卡脖子”的问题。十多年如一日的科研攻关自主,终成就了自身在纳米微球制造方面的隐形冠i军,应该是值得国人为之骄傲和自豪的成就,
选择层析方法
用分离范围宽广的凝胶过滤介质如Superose, Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份
用含专一配体或的亲和层析介质结合目标蛋白,一步即可得到高纯度样品;亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质
体积大的样品,往往使用离子交换层析来浓缩和粗纯化;高盐洗脱的样品再用疏水层析纯化
疏水层析用高盐吸附,低盐洗脱的原理,洗脱的样品又可直接上离子交换介质;两种方法常被交替使用
亲和层析
配体偶联在介质上,纯化能与配体结合的生物分子;通常一步便能得到高纯的样品;配体的特异性越强,所获产品纯度越高用亲和介质提纯单抗非常方便,以重组蛋白A的载量高;蛋白G则能结合更多不同源的IgG
金属鳌合介质(Chelating Sepharose Fast Flow)可反复鳌合不同金属,再用已结合依赖不同金属的蛋白,一种介质可做多种纯化工作
其他常用配体包括:肝素-纯化.酶III,凝血因子脂酶等Cibacron Blue(颜料)-纯化白蛋白,干扰素等外源凝集素如球蛋白A-多糖,糖蛋白等Glutathione谷胱甘三肽-重组融合蛋白等等.
可自行把所需配体偶联到活化偶联介质,的是NHS activated 4 Fast Flow和CNBr activated 4 FF;要注意化学基好不会参与配体和被纯化生物分子的结合作用中
层析填料寿命衰减的影响因素
每次装柱的过程都涉及到填料的脱气处理,及装填柱床时的压缩柱床,然后脱气时的超声或者抽滤都会对填料施压,压缩柱床也要对填料施压,反复的施压及压力控制不当也会使填料的物理性能发生变化从而影响填料的寿命。
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