ELISA试剂盒的操作方法——间接法
以下是北京中检维康生物技术有限公司为您一起分享的内容,北京中检维康生物技术有限公司供应ELISA试剂盒,欢迎新老客户莅临。
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗
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ELISA试剂盒的操作方法——间接法
以下是北京中检维康生物技术有限公司为您一起分享的内容,北京中检维康生物技术有限公司供应ELISA试剂盒,欢迎新老客户莅临。
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二(抗)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.然后用DDW洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
ELISA试剂盒的安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
4. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
5. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
Elisa试剂盒实验原理
将目标包被于微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的结合,然后加入微生物化的目标,将未结合的生物素洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
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