使用冻存袋的方法
复苏细胞应采用融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但好为对数生长期细胞。在冻存天好换一次培养液；将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作，以免；
冻存袋方法的改进
CS50冻存袋代理
使用冻存袋的方法
复苏细胞应采用融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但好为对数生长期细胞。在冻存天好换一次培养液；将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作，以免；
冻存袋方法的改进
自1977年以来,我们应用四级梯度降温冻存法对30余株哺乳动物细胞及2株节肢动物细胞共1000多支安瓶进行了冷冻保存,效果较好,大部分细胞的活存率在70%以上。在此基础上对8株抗登革4型(DEN一4)病毒杂交瘤细胞400多支安靓进行了冻存。鉴于四级降温冻存法步骤多,需要经过4℃冰箱和一20℃冰箱长达7~8小时的梯度降温,较难适应单工作中细胞冻存的需要。因此,自1982年以来我们摸索了影响细胞冻存的主要因素,确定了杂交瘤细胞冻存的适保护剂浓度(1.2〕,并研制成功细胞冻存简易装置。
细胞冻存的原理
在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在－130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快，使之迅速通过细胞易受损的－5～0℃，细胞仍能生长，活力受损不大。
动物细胞冻存组织
1. 首先准备好用于包装样本的铝箔或冷冻保存管，并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样本编号。
2. 准确切除所需组织后，立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。
3. 在RNase-free 的生理盐水中迅速漂洗样本，以去除血渍和污物。
4. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织，迅速投入液氮冷却。
5. 填写样本登记单，写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。
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