冻存袋实验前的准备
生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降温机
冷冻方法理论准备:
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-8O℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量消失,亦可
CS50冻存袋报价
冻存袋实验前的准备
生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降温机
冷冻方法理论准备:
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-8O℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量消失,亦可跳过此步骤直接放入-8O℃冰箱中。
(2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-8o℃以下) -120℃,再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
细胞冻存步骤
1.用移液器吸走原培养基,加入适量PBS洗1-2遍;
2.加入适量胰酶,置于培养箱中消化;
3.待消化到位后加入适量血浆或完全培养基终止消化,800-1000rpm离心3-5min;
4.配制冻存液,待细胞离心后去上清,加入冻存液重悬,调整细胞浓度为3×106~1×107 cells/mL,转移到冻存管中;
5.将冻存管放入程序降温盒中,-80度过夜,然后转移到液氮中保存。
6.冻存细胞后应取出一管复苏,检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存,
为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养,观察细胞生长情况,再继续冻存
细胞冻存运输装置技术领域
公开了一种冻存袋运输稳定装置,其包括顶部开口的筒体,所述筒体的底部设有若干通孔,所述筒体的内部间隔设有若干隔板,所述筒体内部位于各所述隔板的两侧分别设有限位板,所述限位板与各所述隔板的同—侧相连;相邻两所述隔板与两侧的所述限位板之间限定有用于放置冻存袋的储藏空间.本实用新型的有益效果在于:
冻存袋,可千万别这么用哈!
1.不要使用金属管夹
2.不要离心
3.不要在冻存袋上直接写字标识冻存细胞的信息
4.不要在冻存袋表面粘帖标签不推荐使用同一冻存袋多次冻融细胞
5.DMSO稀释以后才能放进冻存袋,DMSO浓度不要超过10%
6.复苏细胞时建议把冻存袋放在一个保护袋中进行融化
7.不要超过冻存袋推荐的工作体积
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