QuickFreezing-M是一种具有自主知识产权、独0特配方的哺乳动物细胞冻存液,其化学组成明确,以DMEM等细胞培养基为母液,含有DMSO,不含血0清或其他蛋白成分。具有高0效、低毒、无外源因子和易于使用等优点,推荐用于常规哺乳动物细胞的冷冻保存。
特点描述
1. QuickFreezing-M化学组成明确,以DMEM为母液,含有DMSO,不含牛
QuickFreezing-2×M
QuickFreezing-M是一种具有自主知识产权、独0特配方的哺乳动物细胞冻存液,其化学组成明确,以DMEM等细胞培养基为母液,含有DMSO,不含血0清或其他蛋白成分。具有高0效、低毒、无外源因子和易于使用等优点,推荐用于常规哺乳动物细胞的冷冻保存。
特点描述
1. QuickFreezing-M化学组成明确,以DMEM为母液,含有DMSO,不含牛血0清或其他蛋白成分。
2. QuickFreezing-M由于其独0特的细胞保护配方,在冻存过程中细胞可直接放入-70℃冰箱,无需繁琐的程序降温操作。
3. QuickFreezing-M不含牛血0清或其他蛋白成分,因而不会引入造成细胞种子污染的外源因子,比如各种牛源病毒和支原体等。
自备材料:
1、细胞计数器
2、细胞冻存管
3、超低温冰箱或液氮
4、超净工作台
操作步骤(仅供参考):
1、培养细胞至对数生长晚期,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。
2、500~1000g离心5min,弃上清。
3、加入适量的通用细胞冻存液,重悬细胞,使细胞浓度达到1~10×106/ml,置于冻存管中,密闭、不要拧的太紧,避免弯曲变形。
4、一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃20min,-20℃30min,-70℃过夜,zui后置于液氮罐中长期存储。
原位复苏方式:
1、从冰箱取出冻存培养板,立即放入37℃水浴槽中解冻。
2、待冻存的细胞悬液完全融化后,轻轻吸去细胞冻存液,按照常规换液操作加入新鲜培养基继续进行培养。
细胞冷冻保存方法
冻存管冻存方式:
1、按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
2、按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。(参考:5×105至5×106cells/ml)。
3、取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去离心管中的上清液。
4、加入适量无血0清细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢混合均匀,制成细胞混合液。
5、将离心管中的细胞混合液分装于已标示的冷冻保存管中建议每管1ml或1.5ml。。
6、直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱,冷冻保存。

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