间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
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间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
做好对照正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊、兔或BSA等封闭。实验条件的选择在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:（1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚、聚、聚丙酰胺和纤维素等。
此外, 白介素6在多种炎性疾病和自身疾病发挥重要的作用. 此试剂盒能高灵敏度的检测小鼠和细胞基质上清的白介素6 原理 此试剂盒运用了两种特异性,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与小鼠的白介素-6的量成正比. 检测范围 10.94的 700 pg/mL 预期用途
一、ELISA实验通用规则1、要保证移液的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排各一支。吸取不同的液体后，要更换头。即使是吸取标准品时。3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
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